动物实验基本技术(研究生课).ppt

毒理学实验常用动物实验技术 毒理室 2014年09月11日 第一节、动物实验前的准备 第二节、实验动物的捉拿与固定 第三节、实验动物的麻醉 第四节、供试品的给予方法 第五节、各种检验标本的采集方法 第六节 实验动物的安死术 第七节 尸体检查及脏器标本采集原则与 检查方法 第八节 实验外科的基本操作技术 第九节 动物实验中的安全防护 第十节 动物实验后废弃物的无害化处理 第一节 动物实验前的准备 一、动物实验室的选择 二、实验动物的购买 三、实验动物编号与标记 一、动物实验室的选择 1.根据实验目的选择合适的实验室及饲养室。 2.动物实验室要与实验动物同等级别。 3.饲养室应符合实验动物的生活习性及国家实验动物设施各项标准。 二、实验动物的购买 1.应购买有实验动物生产供应许可证的单位所生产繁殖的实验动物，并应索取相应实验动物的质量合格证明。 2.如果从外地购买的动物，应考虑运输中的各种因素对实验动物的影响，并应查阅运输检疫证明。 3.购买的动物需要经过3-7天的隔离检疫、观察。 三、实验动物编号与标记方法 （一）染色法： 1、单色涂染法：在每组动物不超过l0只或一个实验不超过40只的情况下适用。 实验动物：大鼠、小鼠。 常用染色剂：3-5％苦味酸溶液， 可染成黄色。 方法步骤： (1)涂染原则：从左到右、从上到下。 (2)左前肢为l号、左侧腹部2号、 左后肢3号。 (3)两耳后部4号、背中部5号、 后肢背部6号。 (4)右前肢7号、 右侧腹部8号、 右后肢9号。 (5)尾巴根为10号。 （6）额部为20号 2、双色涂染法： 在每组动物不超过100只的情况下 适用。 实验动物：大鼠、小鼠。 常用染色剂： (1)3-5％苦味酸溶液，可染成黄色。 ——作为“个”位数。 (2) 0.5%中性红或品红溶液，可染 成红色。——作为“十”位数。 方法步骤： (1) 用两种颜色同时进行染色标记。 (2) 用苦味酸(黄色)染色标记作为个位数，个位数的染色标记方法同单色涂染法。 (3) 用品红(红色)染色标记作为十位数， （4）左前肢为10号、 左侧腹部20号、 左后肢30号， 两耳后部40号、 背部50号、 后肢背部60号， 右前肢70号、 右侧腹部 80号、 右后肢90号 第100号不作染色标记。 （二）穿耳孔法 用专用耳空器在动物耳朵不同部位打一小孔或缺口表示一定号码的方法，原则是：左耳代表十位，右耳代表个位。实验动物：兔、犬、猪 （三）标牌法 一般挂在动物的颈部、耳朵、脚上或 实验动物：犬、猴 （四）烙印法 （五）剪毛法 第二节 实验动物的捉拿与固定 大小鼠的捉拿与固定 豚鼠的捉拿与固定 兔的捉拿与固定 犬的捉拿与固定 一、小鼠的抓取保定： 器材：小鼠饲养盒+面罩1套。 方法步骤： 1、用右手拇指和食指捏 住小鼠尾巴中部将小鼠提 起，放在饲养合的面罩上。 2、用左手拇指和食指迅速、 准确地捏住小鼠的两耳后及 颈背部的皮肤，将小鼠提起。 3、翻转左手掌，以左手掌心和中指夹 小鼠背部的皮肤，使小鼠整个呈一条 直线。 4、用左手无名指 压住小鼠背部的 皮肤，小指压住 小鼠的尾巴根部。 5、松开捏住小鼠尾 巴的右手拇指和食指。 此法适用于肌注、腹腔注射、灌胃等 二、大鼠的抓取保定： 大鼠的抓取保定： 器材：大鼠饲养盒 + 面罩 1套。 方法步骤： 4-5周内的大鼠，方法同小鼠。周龄较大的，则： 1、首先戴好防护手套。 2、用右手拇指和食指抓住大鼠尾巴中部将 大鼠提起，放在大鼠饲养盒的面罩上。 3、左手顺势按、卡在大鼠躯干 背部，稍加压力向头颈部滑行。 4、以左手拇指和食指捏住大鼠两耳 后部的头颈皮肤，其余三指和手掌 握住大鼠背部皮肤，完成抓取保定。 三、豚鼠的抓取保定 器材：大鼠饲养盒+带面罩 l套。 方法步骤： 1、先用左手轻轻扣、 按住豚鼠背部。 2、顺势抓紧其肩胛上方皮肤， 拇指和食指环箍其颈部。 3、用右手轻轻托住其臀部， 即可将豚鼠抓取保定。 抓豚鼠时，一般不要抓腰腹部位， 否则易造成肝破裂而引起死亡。