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实验一 显微镜的使用及用显微镜观察各种细胞（P7） （一）显微镜的使用【初中实验的复习】 一、光学显微镜的结构、呈像原理、放大倍数计算方法 1．结构： 光学部分：目镜、镜筒、物镜、遮光器（有大小光圈）和反光镜（有平面镜和凹面镜） 机械部分：镜座、倾斜关节、镜臂、载物台（上有通光孔、压片夹）、镜头转换器、粗、细准焦螺旋。 注：目镜无旋转螺丝，镜头越长，放大倍数越小；物镜有旋转螺丝，镜头越长，放大倍数越大。 【此处经常出题，如选择放大倍数较大的一组物镜和目镜的组合，要注意会辨认目镜和物镜】 2．呈像原理：映入眼球内的是倒立放大的虚像。（物镜质量的优劣直接影响成像的清晰程度） 3．放大倍数：目镜和物镜二者放大倍数的乘积） 注：显微镜放大倍数是指直径倍数，即长度和宽度，而不是面积。 【此处考计算题，计算视野中细胞的个数，要注意，当考察满视野细胞的时候，长度和宽度都放大了，实际上是放大了2次。 如5x，10x视野中，有128个细胞，那么换成了5x，40x的时候，视野中只有8个细胞。 但有特殊，如5x，10x视野中有一行细胞16个，那么换成了5x，40x后，视野中的细胞为4个，因为只有一行细胞存在的时候，只考虑放大一次就可以了。】 二、显微镜的使用： 1．一般显微镜的操作流程【此处内容理解，理解的意思是自己要确实会使用显微镜】 置镜（装镜头）→对光→置片→调焦→观察 安放。显微镜放置在桌前略偏左，距桌缘8—10cm处，装好物镜和目镜 对光。转动转换器，使低倍镜对准通光孔，选取较大光圈对准通光孔。左眼注视目镜，同时把反光镜转向光源，直至视野光亮均匀适度。调节视野亮度只可用遮光器和反光镜，光线过强，改用较小光圈或用平面反光镜；光线过弱，改用较大光圈或用凹面反光镜。选低倍镜→选较大的光圈→选反光镜（左眼观察） 观察。将切片或装片放在载物台上，标本正对通光孔中心。转动粗准焦螺旋（顺时针），俯首侧视镜筒慢慢下降，直到物镜接近切片（约0.5cm），左眼观察目镜，（反时针）旋转粗准焦螺旋，使镜筒慢慢上升，看到物像时轻微来回旋转细准焦，直到物像清晰。（找不到物像时，可重复一次或移动装片使标本移至通光孔中心）。．观察时两眼都要睁开，便于左眼观察，右眼看着画图。侧面观察降镜筒→左眼观察找物像→细准焦螺旋调清晰 2．使用显微镜的注意事项【此处内容了解】 搬动显微镜时，要一手握镜臂，一手扶镜座。 粗、细准焦螺旋要配合使用，细准焦螺旋不能单方向过度旋转，调节焦距时，要从侧面注视镜筒下降，以免压坏标本和镜头。 用单筒显微镜观察标本，应双眼同时睁开，左眼观察物像，右眼用以绘图，左手调节焦距，右手移动标本或绘图。 显微镜光学部件有污垢，可用擦镜纸或绸布擦净，切勿用手指、粗纸或手帕去擦，以防损坏镜面。 实验完毕，要将玻片取出，用擦镜纸将镜头擦拭干净后移开，不能与通光孔相对。用绸布包好，放回镜箱。切不可把显微镜放在直射光线下曝晒。 3．重要：高倍镜的使用 顺序：移装片→转动镜头转换器→调反光镜或光圈→调细准焦螺旋 注：换高倍物镜时只能移动转换器，换镜后，只准调节细准焦和反光镜（或光圈）。 【此处考题繁多，务必注意】 三．相关问题 1．低倍镜换为高倍镜后，若看不到或看不清原来的像，可能原因？（ABC） A、物像不在视野中 B、焦距不在同一平面 C、载玻片放反，盖玻片在下面 D、未换目镜 2．放大倍数与视野的关系： 放大倍数越小，视野范围越大，看到的细胞数目越多，视野越亮，工作距离越长； 放大倍数越大，视野范围越小，看到的细胞数目越少，视野越暗，工作距离越短。 故装片不能反放。 3．装片的制作和移动：制作：滴清水→放材料→盖片 移动：物像在何方，就将载玻片向何处移。（原因：物像移动的方向和实际移动玻片的方向相反） 4．污点判断： 1）污点随载玻片的移动而移动，则位于载玻片上； 2）污点不随载玻片移动，换目镜后消失，则位于目镜；换物镜后消失，则位于物镜； 3）污点不随载玻片移动，换镜后也不消失，则位于反光镜上。 （二）用显微镜观察各种细胞 一．实验目的： 1）使用高倍显微镜观察几种细胞，比较不同细胞的异同点 2）运用制作临时装片的方法 二．实验原理：利用高倍镜可以看到某些在低倍镜下无法看到的细胞结构，例如：可以看到叶绿体、线粒体等细胞器，从而能够区别不同的细胞。 三．方法步骤：使用高倍镜的方法 四．相关问题 1．是低倍镜还是高倍镜的视野大，视野明亮？为什么？ 提示：低倍镜的视野大，通过的光多，放大的倍数小；高倍镜视野小，通过的光少，但放大的倍数高。 2．为什么要先用低倍镜观察清楚后，把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观察？ 提示：如果直接用高倍镜观察，往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。因此，需要先用低倍镜观察清楚，并把要放大观察的物像移