第一节 核酸的分离纯化第二节 聚合酶链式反应(PCR) 第三节 凝胶电泳系统第四节 核酸的分子杂交第五节 核苷酸序列分析第六节 细胞转化 分子生物学研究之所以从20世纪中叶开始得到高速发展,其中最主要的原因就是现代分子生物学研究方法、特别是基因操作和基因工程技术的进步。 基因工程诞生的基础 1、理论上的三大成就 2、技术上的二大发明 一把特殊的剪刀—限制性内切酶的发现阿尔伯(Arber)、史密斯(Smith)和内森斯(Nathans),获1978年诺贝尔生理学和医学奖 第一节 核酸的分离纯化 主要内容 前言 一、核酸分离、纯化原则 (一)保持核酸分子一级结构的完整性 (二)防止核酸的生物降解 二、分离提取核酸的主要步骤 (一)细胞的破碎 (二)核蛋白的解聚、变性蛋白的去除 (三)核酸的沉淀 (四)核酸的浓度测定 (五)核酸的保存 核酸(nucleic acid)是遗传信息的携带者,是基因表达的物质基础。 无论是进行核酸结构还是功能研究,首先需要对核酸进行分离和纯化。 核酸样品质量将直接关系到实验的成败。 一、核酸分离、纯化原则 (一)保持核酸分子一级结构的完整性 1 意义 遗传信息全部储存在一级结构之中,核酸的—级结构还决定其高级结构的形式以及和其他生物大分子结合的方式。 2 分离核酸原则: 1)
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