厌氧菌110全解.ppt

标本的接种 初代培养应同时接种固体、液体两种培养基，且每份标本应同时接种3个平板，分别置有氧、无氧和含5-10% CO2环境培养。 为了便于在混合培养物中发现厌氧菌，一般将标本分3区划线接种于平板上，在1、2区交界处，贴一张含5μg/片的甲硝唑纸片，如纸片周围出现抑菌圈，表明有厌氧菌存在。 培养方法 通过物理、化学或生物学等方法，创造一种无氧的环境 常用的厌氧培养法： 1.厌氧罐法 2.气袋法 3.厌氧手套箱 4.厌氧工作站 结果观察 厌氧菌的初代培养生长较慢，故应在48ｈ后才能初步观察。 观察时应注意： 1.厌氧菌在对数生长期对氧非常敏感，故在 培养的48ｈ内不应使细菌暴露于空气中 2.标本镜检阳性，但培养48ｈ却无菌生长， 应继续培养5～7ｄ。　　 鉴定试验 形态与染色：不仅能反映各种厌氧菌的特殊形态，同时也为鉴定厌氧菌提供参考依据。 菌落性状：包括其形态、大小、色素、荧光及溶血等 快速鉴定：其原理是依据细菌在代谢过程中所产生的胞外酶与少量生化基质迅速反应，能在4小时观察结果。 其他：气液相色谱、PCR和基因探针等方法。 * * 复习思考题 名词解释： 厌氧芽胞梭菌 破伤风 气性坏疽 汹涌发酵现象 类毒素 抗毒素 如何预防破伤风、气性坏疽? 肉毒性食物中毒有何特点？ 如何避免厌氧菌感染性疾病？ 厌氧菌感染性疾病标本的采集应注意什么？ 及时清创扩创 注射青霉素 高压氧舱治疗 防治原则 微生物学检查法（一） 直接涂片镜检 深部创口取材涂片 革兰阳性大杆菌 白细胞少且不典型 伴有其他杂菌 早期诊断可避免患者最终截肢或死亡 分离培养及动物实验 接种血平板或庖肉培养基，镜检及生化反应鉴定 动物实验 如怀疑食物中毒，在发病后一日内，检出大于105病菌/克食品或106病菌/克粪便可确立诊断。 微生物学检查法（二） 防治原则 预防 及时处理伤口，破坏和消除厌氧微环境 预防性的使用抗生素 治疗 局部感染的处理 抗生素 α抗毒素 高压氧舱法 3.肉毒梭菌（C.botulinum） 芽胞椭圆形，粗于菌体，位于次极端，呈汤匙状或网球拍状； 神经毒素分A～G 7个型，各型毒素只能被同型抗毒素中和； 肉毒毒素不耐热，煮沸1分钟即可被破坏。 致病性 致病物质 肉毒毒素 剧毒（对人致死量为0.1μg) 作用机制 作用于外周神经肌肉接头处，抑制外周神经介质乙酰胆碱的释放，导致弛缓性麻痹。 前体分子存在，可稳定存在于外环境和胃肠道。复合物进入小肠后，在碱性情况下解离，被吸收进入血循环。 所致疾病 食物中毒 进食污染食物（多为罐头、肉制品、豆制品）发生食物中毒---食入毒素 临床表现：少见胃肠道症状，主要为神经末梢麻痹（松弛型） 婴儿肉毒病 以6个月以内的小婴儿居多 症状与肉毒食物中毒类似，便闭、吸乳、啼哭无力 微生物学检查法 标本 食物中毒患者：食物 婴儿肉毒病患者：粪便 粪便、食物等标本可先80℃加热10分钟，再厌氧培养 毒素检查 防治原则 加强食品卫生管理和监督，提高防范意识（低温保存食物，高温破坏毒素）。 尽早根据症状作出诊断，迅速注射A、B、E三型多价抗毒素，同时加强护理和对症治疗。 4.艰难梭菌（C.difficile） 该菌是人和动物肠道寄生菌，在幼儿的粪便中最常见，为肠道正常菌群成员。 长期或大量使用抗菌药物后，使得艰难梭菌被药物选择出后大量繁殖而导致抗生素相关性腹泻。 生物学性状 革兰阳性粗长杆菌，大小约1.3～1.6μm×3.6～6.4μm，有的菌株有周鞭毛，芽胞为卵圆形，位于菌体次极端，无荚膜。 严格厌氧，在血琼脂平板上，48h培养后，菌落直径3～5mm，圆形，略凸起，白色或淡黄色、不透明、边缘不整齐、表面粗糙。在CCFA平板上生长的菌落在紫外线照射下可见黄绿色荧光。 艰难梭菌在血平板上菌落特征48h 艰难梭菌在CCFA平板上菌落特征48h 致病性 产生A、B两种毒素 A毒素为肠毒素，能使肠壁出血坏死，液体积蓄 B毒素为细胞毒素，能直接损伤肠壁细胞，造成伪膜性结肠炎。 * * 　无芽胞厌氧菌 1. 无芽胞厌氧杆菌 G-杆菌：类杆菌属和梭杆菌属　1-1. 脆弱类杆菌： 寄生消化道 腹部和会阴部感染、脑脓肿、败血症等　1-2. 产黑色素类杆菌 ：寄生口腔、下消化道及泌尿生殖道、口腔、牙龈感染，泌尿生殖道感染等　1-3. 梭杆菌属 ：寄生口腔和上呼吸道致牙周炎 G+杆菌：丙酸杆菌属、真杆菌属、乳酸杆菌属和双歧杆菌属 2. 厌氧性球菌　G-球菌 ：以韦荣菌属最重要，咽喉部主要厌氧菌。 G+球菌 ：消化链球菌属，主要寄居阴道。 革兰阳性