第三章药品质量标准分析方法的验证..doc

第三章 药品质量标准分析方法的验证 药品质量标准的分析方法必须经过评价（evaluation），或验证（validation）。 《中国药典》（2010 年版） 收载了“药品质量标准分析方法验证指导原则”（附录 ⅩⅨ A） 验证的目的： 证明采用的方法适合于相应的检测要求。 验证的范围： 建立药品质量标准时，药物生产工艺变更，制剂处方变更时，对原分析方法进行修订时，均需对有关的检验方法进行验证。 需验证的分析项目：鉴别试验，杂质检查（限量检查、定量检查），含量测定，制剂溶出度、释放度检查中溶出量的测定方法等。 验证的内容：准确度、精密度、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。 一. 准确度（accuracy） 定义：准确度是指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度。一般用回收率（%）表示。 1. 含量测定方法的准确度 （1）原料药 a. 用已知纯度的对照品或样品进行测定；（计算回收率，或用t检验判断） b. 用本法测定的结果与已知准确度的另一方法的测定结果进行比较。 （用t检验判断） （2）制剂 a. 回收试验：在空白辅料中加入已知量的测定组分的对照品，混匀，作为模拟样品，用待考查的方法测定，计算回收率。 b．加样回收试验：如不能得到制剂的全部组分，可在已知含量的样品中加入一定量测定组分的对照品，用待考查的方法测定，计算回收率。 c. 用本法的结果与已知准确度方法测定的结果进行比较。（用t检验判断） （3）如该分析方法已经测试并求出了精密度、线性和专属性，在准确度也可以推算出来的情况下，这一项可不必再作。 2. 杂质的定量测定 a. 回收试验：向原料药或制剂加入已知量的杂质进行测定。 b. 如不能得到杂质或降解产物，可用本法测定结果与另一成熟的方法进行比较。 c. 可以使用主成分作为对照进行测定。 3. 数据要求 在规定范围内，至少用9个测定结果进行评价。如用高、中、底三个浓度，每个浓度分别制备3份供试品溶液进行测定。 应报告回收率，测定值与真实值之差或可信限。 4. 讨论 （1）回收试验的测定方法应与验证的方法一致，应包括验证方法的所有步骤。应报告样品含量（加样回收试验）、加入量、测得量、回收率、平均回收率和RSD。（测定范围见 〝范围″项下） （2）制剂：化学药品制剂一般作回收试验，中药制剂作加样回收试验。加样回收试验中对照品的加入量和供试品中被测成分的含有量之和应在标准曲线范围内，一般中间浓度的加入量和供试品中被测成分的含有量之比控制在1∶1。 （3）ICH原料药准确度、精密度和线性的验证方法 编 号 第 一 组 第 二 组 第 三 组 X1j Y1j X2j Y2j X3j Y3j 1 60% X11 Y11 X21 Y21 X31 Y31 2 80% X12 Y12 X22 Y22 X32 Y32 3 100% X13 Y13 X23 Y23 X33 Y33 4 120% X14 Y14 X24 Y24 X34 Y34 5 140% X15 Y15 X25 Y25 X35 Y35 100% 按回收率计算日内精密度和日间精密度。 二．精密度（precision） 1. 定义：是指在规定的测定条件下，同一均匀的供试品，经多次取样测定所得到结果之间的接近程度。精密度一般用偏差、标准偏差和相对标准偏差来表示。 (1) 相对标准偏差（relative standard deviation, RSD） 标准偏差为一统计学参数，表示随机变量的离散程度。 标准偏差（S）＝ 相对标准偏差 (RSD) ＝ （2）相对平均偏差 平均偏差（ ）＝ 相对平均偏差= 相对平均偏差无统计学意义，目前多用RSD表示精密度。 2. 测定方法 （1）重复性（repeatability）：在相同的条件下，由同一个分析人员测定所得结果之间的接近程度称为重复性。 在规定范围内，至少用9个测定结果进行评价。如设计3个不同的浓度，每个浓度分别制备3份供试品溶液，进行测定；或取相当于100%的浓度水平的供试品溶液，用至少测定6次的结果进行评价，计算平均值和RSD。 （2）中间精密度（Intermediate Precision）： 在同一个实验室，不同的时间，由不同的分析人员，用不同的设备测定结果的精密度，是