生物：第二部分《实验六 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测》课件10（浙科版选修1）.pptVIP

但必须注意，参加共价结合的氨基酸残基应当是酶催化活性非必需基团，如若共价结合包括了酶活性中心有关的基团，会导致酶的活力损失。 * * * * 知识回顾： 1、在果汁生产中利用________，可以提高果汁的产量和质量，其原理是___________。 你还能画出出汁量和温度关系的曲线吗？ 2、洗衣粉中添加________，可以更有效地清除顽渍。常用的酶制剂有_________________四类。 1、酶制剂的概念和种类 （一）酶制剂 含有酶的制品 ①定义： 多酶片、加酶洗衣粉中的蛋白酶和脂肪酶 ②种类： A、液体酶制剂 治疗某些胃病的胃蛋白酶液 B、固体酶制剂 2、酶的生产 ①提取法 定义：采用一定的技术直接从动植物或微生物的组织、细胞中将酶提取出来 优点： 简单易行，在动植物或微生物资源丰富的地区具有应用价值 实例：在屠宰厂，可以从家畜胰脏中提取出胰酶；在水果加工厂，可以从菠萝皮中提取出菠萝蛋白酶 缺点： 要有充足的原材料，广泛应用受到限制 ②发酵法——常用方法 定义：通过微生物发酵获得所需要的酶。 如果是胞外酶，可以从发酵液中直接提取；如果是细胞内酶，则可将细胞弄碎再经过提取纯化而得到。 易培养、繁殖速度快、便于大规模生产。 优点： 提取方式： 在食品、化工、轻纺、医药等领域大规模使用酶制剂，说明酶制剂使用有很多优点，你能思考后举出一些吗？ 催化效率高、低能耗、低污染等。 酶制剂的使用有缺点吗？ 3、酶制剂的优点 1、通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感，容易失活； 2、溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本； 3、反应后会混在产物中，可能影响产品质量。(难分离） 4、酶制剂的缺点 1、固定化酶技术。即将酶固定在一定空间内的技术（如固定在不溶于水的载体上）。 2、固定化酶技术的优点： （1）使酶既能与反应物接触，又能与产物分离； （2）固定在载体上的酶可以被反复利用。 （3）酶反应过程可严格控制 （二）固定化酶 将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。 3、 酶的固定化方法 酶的固定化方法主要可分为四类：吸附法、共价偶联法、交联法和包埋法等。吸附法和共价偶联法又可统称为载体结合法。 吸附法 共价偶联法 交联法 包埋法 吸附法： 将酶吸附到固体吸附剂表面的方法， 物理吸附法 离子交换法 对蛋白质有高度的吸附能力、又不引起酶变性且能保持一定酶活性。如：活性碳、多孔玻璃、石英砂、有机硅等 举例：α-淀粉酶的固定化 利用蛋白质的两性性质，使其带有电荷的基团与离子交换剂形成离子键，而被交换结合在交换剂上 固体吸附剂 酶 酶和载体结合不牢固，在使用过程中容易脱落，所以使用受到限制。 （2）共价偶联法 是将酶与聚合物载体以共价键结合的固定化方法。 酶中的氨基、羧基、巯基、羟基、咪唑基、吲哚基、苯环等常与载体共价结合 （3）交联法 交联法：是使用双功能或多功能试剂使酶分子 之间相互交联呈网状结构的固定化方法。 其中使用最广泛的是戊二醛。戊二醛和酶蛋白中的游离氨基发生 反应，从而使酶分子之间相互交联形成固定化酶。 戊二醛 但是交联法中酶的活性中心构造可能受到影响，而使酶失活明显。 （4）包埋法：包括凝胶包埋法和微胶囊包埋法 常用的载体有海藻酸钠凝胶 微胶囊包埋法，酶被包埋成微胶囊型 凝胶包埋法，酶被包埋成网格型 常用的载体有聚酰胺、 火棉胶、醋酸纤维素 将酶包裹在多孔的载体中，包埋成格子型或包埋成微胶囊型 固定化酶 直接使用酶 不足 优点 类型 4、比较直接使用酶和固定化酶的优缺点 催化效率高，低耗能、低污染等 酶既能与反应物接触，又能与产物分离，同时，固定在载体上的酶还可以被反复利用 1、一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实践中，很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到 2、催化能力下降 1、对环境条件非常敏感，容易失活； 2、溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本； 3、反应后酶会混在产物中，可能影响产品质量 四、“α-淀粉酶固定化”实验 实验目的：1、制备固定化的α-淀粉酶 2、检测固定化α-淀粉酶的效果 含淀粉的浆液 α-淀粉酶 糊精 糖化酶 葡萄糖 葡萄糖异构酶 葡萄糖的异构化 42%～45%转化成果糖 果葡糖浆 果糖和葡萄糖分离 葡萄糖再次异构化 反复多次 果糖含量70%～90% 高果糖浆 麦芽糖 β-淀粉酶 生产流程 淀粉 糊精 葡萄糖 麦芽糖 遇碘显蓝色 遇碘显红色 遇碘不显蓝色 遇碘不显蓝色 α—淀粉酶 β—淀粉酶 糖化淀粉酶 实验原理 本实验是用吸附