第三章理化检测(食用菌粗蛋白杂质)教程方案.ppt

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VC检测技术 2,4-二硝基苯肼法 (GB第二法) 3、注意事项 (1)试管自冰水中取出后,颜色会继续变深,所以,加入硫酸后30分钟应准时比色。 (2)活性C—氧化剂+脱色剂(深色样品) 无色或已脱色样品—溴或2,6二氯靛酚作氧化剂 (3)硫脲的加入—防止VC继续被氧化 促进脎的形成 食用菌中杂质检测 食用菌中蛋白质检测 测定蛋白质的方法可分为两大类 利用蛋白质的共性,即含氮量(16%) 、肽键测定蛋白质含量 ; 利用蛋白质中特定氨基酸残基、酸性和碱性基团以及芳香基团等测定蛋白质含量。 具体测定方法 凯氏定氮法 水杨酸比色法、紫外分光光度法、双缩脲反应、染料结合反应、酚试剂法、红外光谱 蛋白质含量测定最常用的方法是凯氏定氮法 食用菌中蛋白质检测 凯氏定氮法 测出样品中的总含氮量再乘以相应的蛋白质系数(1/16%)而求出蛋白质的含量 为粗蛋白含量(含有少部分含N非蛋白核酸、生物碱等) 1833年Kieldahl首先提出 常量K氏定N法 微量K氏定N法 自动K氏定N法 半微量K氏定N法、改良法等 食用菌中蛋白质检测 1、原理 样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解 碳和氢被氧化为CO2和H2O逸出 有机氮转化为氨,与硫酸结合成硫酸铵 常量K氏定N法 硫酸铜作催化剂—常量

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