基因工程复习课件讲述.ppt

考查重点： (1)基因工程中三种工具。 (2) 基因工程操作程序。 (3)基因工程成果——转基因生物实例及安全性讨论。 （1）主要来源： （2）作用特点： （3）限制酶识别序列 （4）作用结果： （3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是 。 （4）与只使用EcoR I相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 。 （5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 酶。 （6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。 【答案】（1）0、2 （2）高 （3）SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因 （4）质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化 （5）DNA连接 （6）鉴别和筛选含有目的基因的细胞 3、将目的基因导入受体细胞 植物 动物 微生物 常用方法 受体细胞 农杆菌转化法（双子叶植物和裸子植物 ） 显微注射法（显微注射仪） Ca2+处理法 体细胞、受精卵 受精卵 转化：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 基因枪法（单子叶植物） 花粉管通道法（抗虫棉） 常用转化方法： 农杆菌转化法 T-DNA：位于农杆菌中的Ti质粒上，可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。 复性 变性 变性 15N 15N 14N 14N 受体细胞的DNA 基因探针 （1）检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因 4、目的基因的检测与鉴定 方法：DNA分子杂交技术 工具：基因探针（放射性同位素等标记的含目的基因的DNA分子片段） （2）检测目的基因是否转录出了mRNA 方法：分子杂交技术 15N 15N 14N 基因探针 受体细胞的m RNA 变性 （4）鉴定（个体生物学水平） （3）检测目的基因是否翻译成蛋白质 如：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 方法:抗原--抗体杂交 1、植物基因工程 3、基因工程药物 三、基因工程的应用 2、动物基因工程 培育抗虫、抗病、抗逆转基因植物；利用转基因改良植物的品质 提高动物生长速度；改善畜产品的品质；用转基因动物生产药物（乳腺生物反应器）；用转基因动物作器官移植的供体。 利用转基因的工程菌生产药物（细胞因子、抗体、疫苗、激素等） 4、基因治疗 含义：把正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，是治疗遗传病最有效的手段。 治疗方法： ①体外基因治疗 ②体内基因治疗 现状：临床试验阶段 在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是 ( ) A.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸 B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 C.将重组DNA分子导入烟草原生质体 D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞 A 上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带人白蛋白基因的转基因牛。他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高了30多倍，标志着我国转基因研究向产业化的目标又迈进了一大步。以下与此有关的叙述中，正确的是 ( ) A.所谓“提高基因表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞中含有更多的人白蛋白基因 B.可将白蛋白基因导入牛的卵细胞中，通过组织培养形成转基因牛 C.人们只在转基因牛的乳汁中才能获取人白蛋白，是因为只在转基因牛的乳腺细胞中才有人白蛋白基因 D.运用基因工程技术让牛合成人白蛋白，该技术将导致定向变异 D 基础: 蛋白质工程的实质： 通过: 目标: 蛋白质分子的结构规律及其生物功能 基因修饰或基因合成 改造或制造新的蛋白质，满足人类的生产或生活的需要 是对编码蛋白质的基因进行改造 四、蛋白质工程 满足人类生产和生活的需要 例如： 改造 干扰素（半胱氨酸） 体外很难保存 干扰素（丝氨酸） 体外可以保存半年 玉米中赖氨酸含量比较低 天冬氨酸激酶 （352位的苏氨酸） 二氢吡啶二羧酸合成酶（104位的天冬酰胺） 改造 改造 天冬氨酸激酶（异亮氨酸） 二氢吡啶二羧酸合成酶（异亮氨酸） 玉米中赖氨酸含量可提高数倍 思考：对天然蛋白质进行改造，你认为应该直接对蛋白质分子进行操作，还是通过对基因的操作来实现？ 应该从对基因的操作来实现对天然蛋白质改造，主要原因如下： （1）任何一种天然蛋白质都是由基因编码的，改造了基因即对蛋白质进行了改造，而且改造过的蛋白质可以遗传下去。如果对蛋白质直接改造，即使改造成功，被改造过的蛋白质分子还是无法遗传的。 （2）对基因进行改造比对蛋白质直接改造要容易操作，难度要小得多。 蛋白质工程的流程 基因 DNA 氨基酸序列 多肽链 蛋白质 三维结构 预期功能 生物功能 mR