学位论文---壳聚糖酶高产菌株选育及高效诱变-生物工程.docVIP

本科生毕业论文（设计） 题　　目 壳聚糖酶高产菌株选育及高效诱变 姓　　名 王宇 学号 2011413283 院　　系 生命科学学院 专　　业 生物工程 指导教师 刘金峰 职称 副教授 2015 年 5 月 18 日 曲阜师范大学教务处制 目 录 摘要…………………………………………………………………………………1 关键词………………………………………………………………………………1 Abstract……………………………………………………………………………1 Key words…………………………………………………………………………1 引言（或绪论………………………………………………………………………1 1 材料与方法……………………………………………………………………3 1.1 菌株……………………………………………………………………………3 1.2 培养基…………………………………………………………………………3 1.3 曲霉CJ22一3菌株的UV和60Co诱变………………………………………3 1.4 还原糖的测定………………………………………………………………3 1.5 壳聚糖酶活力的测定………………………………………………………3 2 结果与讨论……………………………………………………………………3 2.1 菌株诱变的结果……………………………………………………………3 2.2 发酵培养基的优化…………………………………………………………4 2.2.1 单一碳源对壳聚糖酶产率和菌体生长的影响…………………………4 2.2.2 复合碳源对产酶影响……………………………………………………4 2.2.3 氮源对产酶的影响………………………………………………………4 2.2.4 金属离子和KH2PO4对产酶影响……………………………………………4 2.2.5 对碳氮源的正交实验优化…………………………………………………5 2.2.6 表面活性剂对产酶的影响…………………………………………………5 2.3 发酵条件的优化……………………………………………………………5 2.3.1 接种量对产酶的影响………………………………………………………5 2.3.2 溶氧对菌株产酶的影响……………………………………………………5 2.3.3 温度、培养基起始声和发酵时间对产酶的影响……………………………6 3 结论……………………………………………………………………………7 3.1 壳聚糖酶选育及诱变…………………………………………………………7 3.2 壳聚糖酶的高效诱变…………………………………………………………7 致谢…………………………………………………………………………………7 参考文 ……………………………………………………………………………8 壳聚糖酶高产菌株的选育及高效诱变 生物工程专业学生 王宇 指导教师 刘金峰 摘要： 从曲师大实验楼后采集的土样中分离到4株产壳聚糖酶的菌株,经过摇瓶复筛,发现菌株曲霉CJ22 - 3产酶效果最好。以自筛曲霉CJ22 - 3为出发株，经紫外线和60Co高效诱变处理，获得1株壳聚糖酶高产菌株CJ22 - 326，经正交实验初步优化了其液态产酶培养基:壳聚糖1.5%,麸皮2% ，( NH4) 2SO4 0.2% ,KH2PO40.2% , MgS040. 05% , Tween一80 0.05% ,pH5.5。优化的发酵条件为:装液量75 mL /250mL三角瓶，摇床转速150r/min，发酵温度为300C，发酵时间为96 h。在此条件下，CJ22 - 326产酶活力为3.06 U /mL 关键词：选育；发酵条件；壳聚糖酶；高效诱变 The Chitosanases High yield strains Of Breeding and?high?mutation Students majoring in biological engineering wangyu Tutor liujingfen