基因工程及其应用54641.pptVIP

（一）、提取目的基因 将需要的基因从供体生物的细胞内提取出来。 用与提取目的基因相同的限制酶切割质粒使之出现一个切口，将目的基因插入切口处，让目的基因的黏性末端与切口上的黏性末端互补配对后，在连接酶的作用下连接形成重组DNA分子。 将目的基因导入受体细胞并扩增 基因工程中常用的受体细胞有细菌和动植物细胞等。 导入受体细胞常用的方法是借鉴细菌或者病毒侵染细胞的途径。通常还要对一些受体细胞进行增大通透性的处理。 目的基因可以随着受体细胞进行快速的繁殖，在很短的时间内获得大量的基因。 目的基因的检测和表达（二） 多细胞生物的检测，将每个受体细胞单独培养并诱导发育成完整个体，检测这些个体是否摄入目的基因，摄入的基因是否表达（是否表现出相应的性状）。淘汰无变化的个体，保留有相应变化的个体进一步培养、研究。 C 例：下列有关基因工程的叙述，正确的是（） A、基因工程所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶和运载体 B、所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列 C、选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖速率快 D、只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达 新新学案 新新学案 新新学案 新新学案 新新学案 新新学案 新新学案 新新学案 新新学案 新新学案 新新学案 新新学案 能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物？ 设想 经过多年的努力，科学家于20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术——基因工程。 基因工程育种 一.基因工程的原理 基因工程的概念: 基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状。 1.基因的“剪刀”──限制性内切酶（限制酶） 　　一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切割点上将DNA分子切断。结果：产生粘性末端。（即DNA一条链上暴露的几个碱基）。 专一性（eg：EcoRI限制酶） 基因工程最基本的工具 2.基因的针线：DNA连接酶 C T T A A G A A T T C G 基因工程最基本的工具 连接酶的作用：将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。 2.基因的针线：DNA连接酶 C T T A A G A A T T C G 基因工程最基本的工具 2.基因的针线：DNA连接酶 C T T A A G A A T T C G 基因工程最基本的工具 2.基因的针线：DNA连接酶 C T T A A G A A T T C G 基因工程最基本的工具 2.基因的针线：DNA连接酶 C T T A A G A A T T C G 基因工程最基本的工具 2.基因的针线：DNA连接酶 C T T A A G A A T T C G DNA连接酶 基因工程最基本的工具 2.基因的针线：DNA连接酶 C T T A A G A A T T C G DNA连接酶 基因工程最基本的工具 C T T A A G A A T T C G 2.基因的针线：DNA连接酶 重组DNA分子 思考：如何将重组DNA分子送入受体细胞呢？ 基因工程最基本的工具 　　要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达，首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去。能将外源基因送入细胞的工具就是运载体。 大肠杆菌 DNA 质粒 （环状DNA分子） 3.基因的运载体(常用)：质粒、噬菌体和动植物病毒 控制质粒DNA转移的基因 抗生素抗性基因 基因工程最基本的工具 运载体条件： 能在宿主细胞内复制并稳定地保存。 具有多个限制酶切点。 具有某些标记基因 取 出DNA 用限制酶切断DNA 目前被较广泛提取使用的目的基因有：苏云金杆菌抗虫基因、人胰岛素基因、人干扰素基因、种子贮藏蛋白基因、植物抗病基因等。 二、基因工程基本步骤 第二步、目的基因与运载体结合 将目的基因导入受体细胞 将受体细胞进行扩增 第四步、目的基因的表达和检测 　　大量的受体细胞接受不多的目的基因。处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少，必须将它从中检测出来。 将每个受体细胞单独培养形成菌落，检测菌落中是否有目的基因的表达产物。淘汰无表达产物的菌落，保留有表达产物的进一步培养、研究。 无表达产物 无表达产物 有表