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2016高三考前鉴定观察类实验大题过关解析
专题一 鉴定观察类实验大题过关
一、鉴定观察类实验大题相关知识必备:
(一)特定的物质、特定的试剂及特定的颜色反应
物质 试剂 预期实验结果 蛋白质 双缩脲试剂(先加A液再加B液,摇匀后使用) 紫色反应 脂肪 苏丹Ⅲ染液或苏丹Ⅳ染液 橘黄色或红色 还原糖 斐林试剂(甲液、乙液现混现用,水浴加热) 砖红色沉淀 淀粉 碘液 蓝色 酒精 酸性重铬酸钾 橙色→灰绿色 CO2 澄清石灰水 石灰水变浑浊 溴麝香草酚蓝水溶液 蓝色→绿色→黄色 染色体(质) 龙胆紫溶液或醋酸洋红 深紫色或紫红色 DNA 二苯胺(水浴加热) 蓝色 吡罗红甲基绿染色剂 DNA被甲基绿染成绿色 RNA 吡罗红甲基绿染色剂 RNA被吡罗红染成红色 线粒体 健那绿(生物实验中唯一的一种活体染色剂) 蓝绿色 说明:并不是所有的实验都需要染色处理才能观察,如用高倍显微镜观察叶绿体、观察植物细胞的质壁分离和复原、叶绿体中色素的提取和分离等实验则不需要染色,利用细胞(或细胞器)自身的颜色即可观察。
二、考查中经常出现的关键解题知识点
(一)双缩脲试剂和斐林试剂的区别
斐林试剂 双缩脲试剂 甲液 乙液 A液 B液 成分 0.1g/mLNaOH溶液 0.05g/mLCuSO4溶液 0.1g/mLNaOH溶液 0.01g/mLCuSO4溶液 鉴定物质 可溶性还原糖 蛋白质 添加顺序 甲乙两液等量混合后立即使用 先加A液1mL摇匀,然后加B液4滴,振荡摇匀 反应条件 50℃~60℃水浴加热 不需要加热,摇匀即可 反应现象 样液变砖红色 样液变紫色 特别提醒:①两个实验中都不宜选择有颜色的材料,否则会干扰实验现象。例如:还原糖的实验中应该选择颜色浅的苹果、梨等材料,而颜色深的绿色白菜、甘蓝叶、西瓜、番茄、血液等就不适合做实验材料;
②在鉴定还原糖的实验中应该注意选择还原糖,非还原糖的材料比如蔗糖、甜菜的块根等不适合做实验材料,这两种材料中含有的糖为蔗糖,属于非还原糖;
③在检测蛋白质的实验中,若用鸡蛋清作实验材料,必须稀释,以免实验后粘住试管,不易洗刷;
④Cu2+呈现蓝色,因此CuSO4的用量较少,以免因过量使用而遮盖实验结果的颜色;
⑤唯一需要加热——还原糖鉴定,且必需水浴加热,不能用酒精灯直接加热。若不加热则无砖红色沉淀出现。唯一需要显微镜——脂肪的鉴定,实验用50%酒精的作用——洗掉浮色;
⑥非还原糖(如蔗糖)+斐林试剂水浴加热后的现象不是无色而是浅蓝色[Cu(OH)2]的颜色;
⑦还原性糖的鉴定是新制的Cu(OH)2与醛基的反应,产生Cu2O沉淀,而蛋白质的鉴定是在碱性环境下Cu2+与肽键结合成特定化合物的显色反应,原理的不同决定了实验操作方法的不同。
(二)在“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中
1.选材时应选用口腔上皮细胞、无色的洋葱表皮细胞,而不能用紫色洋葱表皮细胞或叶肉细胞等,防止颜色的干扰;
2.甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。两种染色剂混合使用且现配现用;
3.质量分数为8%盐酸有两个作用:一是改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞;二是使染色质中的DNA与蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合;
4.质量分数为0.9% NaCl溶液(生理盐水)的作用是保持口腔上皮细胞正常形态;
5.在制备装片时有一个“冲洗涂片”的过程,此时应用蒸馏水的缓水流冲洗,“冲洗”的目的是为了洗掉盐酸,“缓水流”的目的是为了防止玻片上的细胞被冲走。
(三)与显微镜相关问题的分析
1.目镜与物镜的结构、长短与放大倍数之间的关系:
(1)目镜无螺纹,直接在镜筒上拔插,物镜有螺纹,需安装在转换器上。
(2)放大倍数与长短的关系
①物镜越长,放大倍数越大,距装片距离越近。
②目镜越长,放大倍数越小。
(3)显微镜放大倍数的含义
①显微镜放大倍数是指物像边长的放大倍数,而不是面积的倍数。如一个面积为π的圆放大100倍后其面积为10000π。
②总的放大倍数是目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积,如物镜为10×,目镜为16×,其放大倍数就为10×16=160倍。
③若视野中细胞排成一行,则计算时只考虑长度或宽度;若视野中充满了多个细胞,计算时应考虑面积的变化。
2.成像规律:显微镜成的是倒像(上下左右全倒)如字母b看到的像是q,因此若所要观察的物像在视野的右上方,想要移到视野中央应该向右上方移动。但是如果观察到物像中细胞质的流动方向为逆时针流动,真实的流动方向也为逆时针。
3.由低倍镜换高倍镜时直接转动转换器,不能调粗、细准焦螺旋,上升或下降镜筒。
4.由低倍镜换高倍镜视野将会变暗。
5.由于显微镜的视野是一定的,所以放大倍数越大,观察到的细胞数目越少。放大倍数越小,观察到的细胞数
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