交叉配血唾液定型课件.pptVIP

实验二 交叉配血、唾液定型 实验目的 掌握交叉配血的原理、方法和临床意义 熟悉唾液定型的原理、方法和临床意义 交叉配血原理 交叉配血试验是输血前必须做的红细胞系统的配合性试验，以确定受者或供者血液没有可测的不相配合的抗原和抗体成分 试验包括主侧和次侧配血： 主侧是受血者血清与供血者红细胞的反应 次侧是受血者红细胞和供血者血清的反应 只有两侧均不凝集或溶血才能输血 方法 盐水介质法 酶法 抗人球蛋白法 凝聚胺介质法 凝胶法 盐水介质法 天然IgM类血型抗体可与对应的红细胞在室温盐水介质中出现凝集反应，通过离心观察主次侧有无凝集现象。 实验步骤 1.分离患者血清，1000r/min 5min，标记为PS 2.配制2%患者红细胞生理盐水悬液（需洗涤），标记为PC 3.分离献血员血清，标记为DS 4.配制2%献血员红细胞生理盐水悬液（需洗涤），标记为DC 5.交叉配血：取试管两支，标记为主、次 主侧配血管分别加PS2滴，DC1滴 次侧配血管分别加DS2滴，PC1滴，混匀， 1000r/min 30sec 6.观察结果：先观察试管上层有无溶血，再斜持试管轻轻摇动，观察管底有无凝集 注意事项 1.用于交叉配血的病人(受血者)血液标本应该是抽取的新鲜血，供血者的标本是刚从血袋剪下来的原已加热封闭两端小管中的血液。 2.用试管法作交叉配血试验，不能用玻片法。 3.用生理盐水洗涤红细胞去除血浆，预防纤维凝块的形成 4.为确保输血安全，应输同型血。 5.主次侧均无凝集反应表示配血相合，血液可以输注；任何一侧凝集或两侧均凝集为配血不合，禁忌输血 6.配血试管中发生溶血现象时表明有抗原抗体反应并激活补体引起红细胞溶血，必须引起高度重视。 7.加样时注意红细胞与血清的比例要适当（一般1：2为宜），比例失当时可能导致假阴性反应；反应温度也不能过低，以免非特异性冷抗体引起的冷凝集反应造成假阳性结果 8.本法只能检测出IgM类完全抗体，不能检出IgG类免疫性的不完全抗体，对于有输血史（尤其是有输血反应史）、妊娠、免疫性疾病史和器官移植史的病人就不宜单独使用 临床意义 1．进一步验证受血者与供血者血型鉴定是否正确，发现ABO血型的不规则抗体以及ABO血型以外的配血不和，以避免血型鉴定错误而导致的输血后严重溶血反应。 2．若受血者一次输血超过1 600～2 000ml时，除了做受血者与供血者之间的交叉配血外，还应作供血者之间的交叉配血，以防止供血者相互间血型不合及不完全抗体的存在，保证输血安全。 唾液定型原理 ABH抗原不但存在于红细胞膜表面，还可存在于血清、唾液、胃液、精液、尿液、羊水和腹水等体液中，这些可溶性的抗原物质又被称为“血型物质”。凡体液中可检出这种血型物质者为分泌型；无血型物质者称为非分泌型。 唾液+定量抗体 → +RBC + 无血型物质 - 有血型物质 实验步骤 1.唾液收集：5-10ml（可煮沸10min灭活唾液酶，离心取上清） 2.洗涤ABO型RBC，分别配成2%红细胞生理盐水悬液 3.将抗A、抗B、抗H血清用生理盐水分别1：16稀释 800r/min，2min后，判断结果 抗H管凝集为非分泌型，不凝为分泌型 抗A管 抗B管 A型： - + B型： + - O型： + + AB型： - - 临床意义 ①通过测定唾液中的血型物质辅助鉴定血型； ②中和ABO血型系统中的“天然抗体”有助于检查免疫性抗体； ③通过检查羊水中的血型物质可预测胎儿ABO血型等。 * * 无游离抗体 混匀，室温5min - - 0.1 2%A型RBC - 0.1 - 2%B型RBC 0.1 - - 抗H血清 混匀，室温5min 0.1 - - 2%O型RBC - 0.1 - 抗B血清 - - 0.1 抗A血清 0.1 0.1 0.1 受检者唾液 抗H管 抗B管 抗A管 反应物