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SRTP项目中期报告 一、项目的意义 近几年来，发酵床养殖技术得到越来越多的应用，已经成为人们养殖业中重要的组成部分。其中发酵床垫料是发酵床的核心，而发酵床主要由锯末、稻壳、玉米秸秆等混合形成，其成分主要是纤维素，因此研究纤维分解菌是很有意义的。纤维分解菌产生的纤维素酶可将垫料中的大部分纤维素转化为二糖或单糖，被细菌自身利用合成菌体蛋白供动物采食，既节省饲料资源，又减少环境污染，提高垫料的肥力。本科研项目通过分析垫料中粗纤维、氮、磷的含量以及重金属铜、锌等的含量变化，为纤维分解菌应用到发酵床提供科学依据。 二、项目实施的环节和具体方法 （一）实施环节 步骤二：采样 　 分别将试验组和对照组（未加入纤维分解菌）的发酵床分为三层，每层取200g垫料混匀，烘干，粉碎，用四分法取50g待测。 步骤三：实验室测定（粗纤维、N、P 、Cu 、Zn的测 定）； 步骤四：数据整理分析。 三、实验预期成果 纤维分解菌能够分解垫料中的纤维素，降低垫料中的纤维素含量，并转化为有益菌群能够利用的C源，提高菌群活性，降低垫料中的N、P含量，以及重金属的含量，从而提高垫料的肥力和降低植物毒性。 四、项目的进展情况 在导师的认真指导下，小组成员通过查阅文献资料，认真积极参加实验。目前已经完成本项目的第一部分工作，即发酵床的制作。包括以下几步： 五、前期实验过程中遇到的困难和问题 垫料的温度很难控制； 菌种的筛选难； 由于上课、考研，实验进度比较慢； 其他。 六、后面实验的计划和安排 在以后的实验过程中，要尽可能多的利用课余时间，尤其是周末，使实验尽早的、保质的完成。 一、发酵菌种采集和培养 （一）菌种来源 森林腐殖质、腐烂的玉米秸杆、牛场料槽旁边土样、麦垛底部土样和牛鸡粪混合储粪中土样。 （二）培养基的制备 蛋白胨5 g，酵母膏5 g，纤维素（新华滤纸）5 g，NaCl 5 g，CaCO3 2 g，K2HPO4 1 g，MgSO4·7H2O 0.5 g，FeSO4·7H2O 0.5 mg，MnSO4·H2O 0.16 mg，ZnSO4·7H2O 0.16 mg，CoCl2 0.2 mg，加蒸馏水至1000 mL，pH 7.0，121℃灭菌25 min。 （三）纤维材料 滤纸以1%醋酸浸泡过夜后，用蒸馏水反复浸泡洗至中性，80℃烘干备用。秸杆和木屑粉碎过1 mm筛，蒸馏水煮沸十分钟，以三层沙布过滤冲洗，80℃烘干恒重后备用。 （四）纤维素分解菌筛选 取5 g土样接入100mL培养基内培养，命名为第1代，待培养液中滤纸分解至不再明显变化，取菌液5 mL接入新鲜培养基内，重复接种，接依次为2、3、4……n代。根据滤纸条的断裂程度判断降解效果：（+）滤纸边缘膨胀；（+ +）为滤纸边缘不定形；（+ + +）滤纸整体不定形；（+ + + +）滤纸成团糊状；（+ + + + +）滤纸完全成糊状。培养过程中，淘汰分解能力不稳定及分解能力退化的菌群。培养条件：28-35℃，80 r/min微震。同时，对筛选出的纤维分解菌扩增后保存。 二、垫料的选择 (一)垫料选择前应考虑两点： 1、从技术角度，垫料原料要求碳氮比高、碳水化合物含量高、疏松多孔透气、吸水吸附性能良好、细度适当、无毒无害、无明显杂质等。 2、从实用的角度来说，垫料原料必须来源广泛，采集采购方便，价格尽可能便宜，质量容易把握。 （二）垫料的选择 根据上面的两点我们选择的垫料原料为： 锯末、稻皮、麸皮、玉米芯、玉米秸秆、猪粪 锯末 由于发酵床垫料原料的碳氮比是发酵体系中最重要的影响因素。理论上讲，碳氮比大于25的原料都可以作为垫料原料，而且碳氮比越高，使用寿命越长。但是，在所有垫料中锯末的碳氮比最高（492：1），最耐发酵。同时锯末疏松多孔，保水性最好，透气性也较好。因此，用锯末制作发酵床是非常好的垫料。 稻壳 稻壳也是很好的垫料原料，透气性能比锯末好，但吸附性能稍次于锯末。使用效果和寿命仅次于锯末。 玉米秸秆 可以铡短后铺到最下层，最好切成20cm-30cm。 麸皮 每立方米用麸皮2kg。 猪粪 添加猪粪10%（锯末稻壳总重的）。 三、发酵床的制作与发酵 （一）混合 在确定好垫料配方后， 将各种原料按配方比例加适量的水混合， 湿度以用手用力抓一把垫料， 手心无明显水渍，手松开垫料自动散开为宜。 注：水分含量45%-55% （二）铺床 在发酵