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* * * * * 第二节 植物的克隆 天使花房 手指玫瑰 1、定义: 生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性。 2、原理: 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体所必需的全部基因,从理论上讲,生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。 3、大小: 受精卵 生殖细胞 体细胞 > > 1、植物细胞的全能性 不同植物或同一植物的不同基因型的个体,细胞的全能性表达程度不同 2、植物组织培养的程序 外植体 脱分化 再分化 胚性细胞 特点:细胞质丰富、液泡小而 细胞核大。 切取 接种 愈伤组织的形成 试管苗的形成 试管苗大规模培养 移栽至土壤 器官培养 指以植物的根、茎、叶、花、果等器官为外植体的离体无菌培养。 指以单个游离细胞为外植体的离体无菌培养。 细胞培养 3、器官培养和细胞培养 无机营养成分:C、H、O大量元素及部分微量元素 有机营养成分 ① 含N物质:包括维生素和氨基酸 ② 碳源:2%—5%的蔗糖 ③ 琼脂:起支持作用 ④ 激素:生长素,细胞分裂素和赤霉素 PH值:5.0-6.0 4、植物组织培养的培养基 5、植物组织培养的应用 (1)试管苗的快速繁殖 (2)无病毒植物的培育 (3)提取原料 (4)人工种子 (5)转基因植物的培育 人工种子解决有些植物结子困难、发芽率低、繁殖困难等问题。 人工种子 6、原生质体培养与植物细胞工程 植物细胞结构图 原生质体培养 植物 细胞 0.5~0.6mol/L的甘露醇 (较高渗透压) 纤维素酶、果胶酶 球型的 原生质体 原生质体:植物细胞除去壁后的部分 为什么要加较高渗透压的甘露醇呢? 防止原生质体吸水胀破 植株 白菜 紫甘蓝 植物细胞工程 × 白菜—甘蓝 “超级植物” (1) (1) (2) (3) (4) (5) 植物体细胞杂交过程示意图 植物A细胞 植物B细胞 去壁 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 融合体 杂种细胞 愈伤组织 杂种植株 去壁的常用方法: 酶解法(纤维素酶、果胶酶等) 原生质体融合方法: 物理法:离心、振动、电刺激等 化学法:聚乙二醇(PEG) 再生壁 细胞 分裂 细胞 分化 * *
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