志贺氏菌检验方法-1.pptVIP

志贺氏菌检验方法 生物学性状 志贺氏菌为革兰氏阴性杆菌，菌体短小，长约2-3μ m ,宽0.5-0.7μ m。不形成芽胞，无荚膜，无鞭毛，有菌毛 。为兼性厌氧菌，在有氧和无氧条件下均能生长；最适生长温度为 36℃，最适pH为7.2～7.4；36℃培养18-24小时后菌落呈圆形、微凸、光滑湿润、无色、半透明、边缘整齐，直径约2mm，宋内氏菌菌落一般较大，较不透明，并常出现扁平的粗糙型菌落。在液体培养基中呈均匀浑浊生长，无菌膜形成。 致病因素 志贺氏菌的致病因素包括侵袭力、内毒素，外毒素。志贺氏菌的菌毛能粘附于回肠末端和结肠粘膜的上皮细胞表面，继而在侵袭蛋白作用下穿入上皮细胞内，一般在粘膜固有层繁殖形成感染灶。各型痢疾杆菌都具有强烈的内毒素。志贺氏菌A群Ⅰ型及部分II型菌株还可产生外毒素，称志贺氏毒素。 志贺氏菌属（Shigella）是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌。细菌性痢疾是最常见的肠道传染病,夏秋两季患者最多。 可经由食物，水，日常接触，苍蝇等传播。 抵抗力 志贺氏菌属在外界环境中的生存力，对理化因素的抵抗力较其他肠道杆菌为弱，对酸敏感 。 一般在潮湿土壤中能存活34天，37℃水中存活20天，在粪便内（室温）存活11天。日光直接照射30分钟，56-60℃10分即被杀死，对高温和化学消毒剂很敏感，1%石炭酸中15-30分钟即被杀死，对氯霉素、磺胺类、链霉素敏感，但易产生耐药性。 XLD琼脂平板 麦康凯琼脂平板 无色至浅粉红色，半透明、光滑、湿润、圆形、边缘整齐或不齐，直径2 mm～3 mm。 培养物中出现下述情况之一者即可弃去： a）在三糖铁琼脂斜面上呈蔓延生长； b）发酵乳糖或蔗糖的； c）不分解葡萄糖和只生长在半固体表面的； d）产气的（福氏志贺氏菌6型可产生少量气体）； e）产生硫化氢的； f）有动力的培养物 2——志贺氏菌??????????? 3——沙门氏菌??????????? ?4——大肠杆菌 血清学分型 凡疑为志贺氏菌，挑取营养琼脂斜面上的培养物，做玻片凝集试验。 先用4种志贺氏菌多价血清检查，如果由于K抗原的存在而不出现凝集，应将菌液煮沸后再检查； 如果呈现凝集，则用A1、A2、B群多价和D群血清分别试验。 　　如系B群福氏志贺氏菌，则用群和型因子血清分别检查。福氏志贺氏菌各型和亚型的型和群抗原见附表。可先用群因子血清检查，再根据群因子血清出现凝集的结果，依次选用型因子血清检查。 4种志贺氏菌多价血清不凝集的菌株，可用鲍氏多价1、2、3分别检查，并进一步用1～15各型因子血清检查。如果鲍氏多价血清不凝集，可用痢疾志贺氏菌3～12型多价血清及各型因子血清检查。 进一步的生化试验 1.VITEK GNI+ (革兰氏染色，氧化酶) 2.API 20E (革兰氏染色，氧化酶) 3.志贺氏菌生化鉴定套装 Thank You! * * 志贺氏菌简介 志贺氏菌检验 1 2 志贺氏菌检验流程图 36 ℃±１℃，6 h～8 h 41.5 ℃±１℃， 16 h～20 h厌氧培养 XLD琼脂 MAC琼脂或志贺氏菌显色培养基 36 ℃±１℃，20 h～48 h 挑取可疑菌落 TSI，葡萄糖半固体， 营养琼脂斜面 血清学分型 生化鉴定 志贺氏菌属分群及分型结果 报告 检样 25 g（或25 mL）样品+ 志贺氏菌增菌肉汤225 mL 检样 25 g（或25 mL）样品+ GN增菌液225 mL 志贺氏菌 沙门氏菌 菌落呈粉红色，带或不带黑色中心，有些菌株可呈现大的带光泽的黑色中心，或呈现全部黑色的菌落；有些菌株为黄色菌落，带或不带黑色中心。 粉红色至无色，半透明、光滑、湿润、圆形、边缘整齐或不齐，直径1 mm～2 mm。