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分 子 生 物 学 检 查 分子生物学定义 分子生物学（molecular biology)是从分子水平研究生命现象的科学。它的核心内容是通过生物的物质基础—核酸、蛋白质、酶等生物大分子的结构、功能及其相互作用等运动规律的研究来阐明生命分子基础，从而探索生命奥秘 分子生物学发展简史 1871年 Miesscher 首次从莱茵河鲑鱼精子中分离到DNA 1953年 Watson和Ｃrick 阐明DNA双螺旋结构 1958年 Meselson 和Stahl 提出DNA半保留复制模型 1965年 发现质粒 1966年 Nirenberg 等破译全部遗传密码 1970年 Smith分离到第一种核酸内切限制酶 1973年 Boyer和Cohen 建立DNA重组技术 1977年Sanger以及Maxam 和Gilbert 发明快速DNA测序技术 1981年 Palmiter和Brinster成功获得第一只基因小鼠 1985年 PCR方法问世；Watson出任“人类基因组计划”首席科学家 1990年 美国批准第一个体细胞基因治疗方案 分子生物学发展简史 1995年 英国“自然”杂志发表人类基因组全物理图 1997年 英国爱丁堡罗斯林研究所培养出第一只克隆羊多莉 1999年 中国正式加入“人类基因组计划（HGP）” 2000年 全部人类基因组测序工作宣告完成，进入 后基因组计划时代( 基因克隆计划、基因组多样性计划、 cDNA计划、蛋白质计划、细胞计划） 分子生物学与现代医学 一、 分子生物学在发病机制中的应用 1 阿尔兹海默病（AD）的基因定位 2 生物活性多肽及蛋白质mRNA研究 确证肾素血管紧张素系统在遗传性高血压发病中起重要作用 3 对某些病毒致病作用的研究 发现肝癌细胞DNA整合有HBV-DNA，认为乙肝与肝癌发病密切相关 4 认识了某些遗传疾病的发病机制 地中海贫血是?或?基因缺失或点突变所致 二、分子生物学在疾病诊断中的作用 发病过程： 基因突变---mRNA---蛋白质（激素）---细胞病变---组织器官病变---临床症状 根据基因突变检测、基因连续性分析、mRNA检测三种途径，使用核酸分子杂交和PCR技术，进行分子生物学检查，使遗传性疾病、感染性疾病和肿瘤等的诊断提前到基因和mRNA水平 三、分子生物学在疾病治疗中的应用 基因治疗： 将目的基因加以修饰，转移到体细胞中，以达到治疗作用 应用： 单基因遗传病、肿瘤、心血管、自身免疫疾病及病毒感染等危害较大且目前无有效治疗途径的疾病 四、重组DNA技术与新药研究 重组微生物、基因疫苗、细胞因子合成、转基因动植物等 分子生物学的一般原理和研究方法 一、核酸的结构和功能 1 核酸的一级结构：磷酸二酯键连接成的核苷酸链 核苷酸：戊糖、磷酸基团、碱基 碱基： DNA：A、 G 、 T 、 C RNA：A、 G 、 U、C 核酸是极性分子，5’端为磷酸基团，3’端为羟基，核酸序列的习惯写法是 5’端 3’端 核酸的结构和功能 2 DNA的二级结构：著名的双螺旋结构 两条核苷酸链通过碱基间氢键相连（A—T， C—G），走向相反。 DNA的变性与复性： 诱导因素：加热、酸、碱、 乙醇、丙酮、高盐等 应用：分子杂交的基础 核酸的结构和功能 3 DNA的三级结构：DNA双螺旋和核小体 串珠装状的核小体压缩成螺旋形，进一步折叠成染色单体，DNA长度因此缩短10000倍 4 DNA功能 携带和传递遗传信息，体现遗传过程的相对保守性 遗传的中心法则 DNA RNA 蛋白质 核酸的结构和功能 5 DNA的 半保留复制原则 核酸的结构和功能 6 RNA： rRNA ：组成核糖体 mRNA ：传递遗传信息由核内至胞浆的核糖体 tRNA：转运氨基酸 密码子：共64个密码子，有61个用于编码20个氨基酸，另外还有3个作为终止密码(UAA、UAG、UGA) 二、基因及其表达调控 基因：合成有功能的蛋白质多肽链或RNA所必需的全部核酸序列。一个基因不仅包括编码序列，还包括所需的调控序列、5’端不翻译序列、内含子和3’非翻译序列等所有核酸序列 基因组： 一个生物体的所有基因。人类指23对染色体中的所有基因 基因及其表达调控 基因表达调控： 多层次 DNA及染色体水平 转录水平