生物化学实验预习及实验报告范例生物化学实验预习及实验报告范例.docVIP

目 录 预习报告示范 2 实验 还原糖和总糖的测定 2 实验二：(Fehling试剂)直接(热)滴定定糖法 2 实验报告示范 15 实验 还原糖和总糖的测定 15 实验二：(Fehling试剂)直接(热)滴定定糖法 15 一、实验原理 15 二、实验用品 15 三、实验操作步骤 16 四、实验记录及计算结果 17 五、结果与讨论 17 预习报告示范 实验 还原糖和总糖的测定 实验二：(Fehling试剂)直接(热)滴定定糖法 一、实验目的和要求 1．初步掌握费林试剂热滴定定糖法的原理和方法。 2．正确掌握滴定管的使用方法和热滴定终点的判断方法。 二、实验原理 思 考 (一)基本原理 还原糖是指含有自由醛基(如葡萄糖)或酮基(如果糖)的单糖和某些二糖(如乳糖、麦芽糖)。 在碱性溶液中，还原糖能将金属离子(Cu2+、Hg2+、Ag+等)还原，而还原糖本身则被氧化成各种羟酸类化合物。该特性常用于还原糖的定性和定量测定。 (二)本实验反应原理 1、Fehling试剂（又称作酒石酸铜溶液）介绍： A液：由硫酸铜和次甲基蓝组成 1、硫酸铜的作用是什么？ 1、Cu2+用于将来被还原成Cu+ 2、次甲基蓝的作用是什么？ 2、氧化还原指示剂 B液：由氢氧化钠、酒石酸钾钠和亚铁氰化钾组成 3、氢氧化钠的作用是什么？ 3、一、生成Cu(OH)2↓，二、创造碱性反应环境 4、酒石酸钾钠的作用是什么？ 4、用以生成可溶性络合物酒石酸钠铜 5、亚铁氰化钾的作用是什么？ 5、生成可溶性复盐，以便于观察滴定终点 用前将A、B两液等体积混合时，依次反应： (1) 2NaOH + CuSO4 = Cu(OH)2↓ （天蓝色）+ Na2SO4 (2) 在碱性溶液中： 酒石酸钠铜为可溶性络合物。 2、酒石酸铜与还原糖热滴定时的反应： 红色氧化亚铜沉淀生成： 在加热条件下，用样液滴定，样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，酒石酸钾钠铜被还原糖还原，产生红色氧化亚铜沉淀，还原糖则被氧化和降解 反应生成的氧化亚铜沉淀与斐林试剂中的亚铁氰化钾（黄血盐）反应生成可溶性复盐： 6、为什么要生成可溶性复盐？ 6、便于观察滴定终点 亚甲基蓝为氧化-还原指示剂指示滴定终点 7、为什么亚甲基蓝可为滴定终点指示剂？ 7、因为亚甲基蓝氧化能力比Cu2+弱，因此Cu2+会先被还原。当Cu2+被全部还原后，稍过量的还原糖可使蓝色的氧化型的亚甲基蓝还原为无色的还原型的亚甲基蓝，即指示到达滴定终点。 (4) 根据样液消耗量即可计算出还原糖的含量。 三、实验用品 思考 答案 用品量 实际用量 (一)、实验材料：红薯粉（可换淀粉） 班级：16g (二)、实验试剂： Fehling试剂A液: 分别称取15g CuSO4·5H2O和 0.05g 亚甲基蓝于烧杯中； 加50~100mL蒸馏水将它们溶解； 转移到1000mL容量瓶中； 定容到1000mL。 8、为什么要分开配制A、B液？什么时候混合较佳？ 用品：电子天平、100/200mL烧杯1、玻棒、1000mL容量瓶、蒸馏水 计算：5×3×3×n，适当放大（一般多配1/3左右） 配1000mL CuSO4·5H2O = (g) 亚甲基蓝 = (g) Fehling试剂B液: 先称取50g 酒石酸钾钠和+ 75g NaOH，溶于水； 再称取 4g亚铁氰化钾，溶解 分别转移到1000mL容量瓶中； 定容到1000mL。 9、为什么贮存于具橡皮塞玻璃瓶中？ 用品：100/200mL烧杯2、1000mL容量瓶 配1000mL 酒石酸钾钠 = (g) NaOH = (g) 亚铁氰化钾 = (g) (3) 0.1%葡萄糖标准溶液： G在98~105℃下干燥至恒重为无水葡萄糖； 准确称取1.000g无水葡萄糖，用少量蒸馏水溶解； 转移到1000mL容量瓶中，加水约置750ml 往容量瓶中加入5-8mL浓HCl； 定容1000ml。 10、G为什么在98~105℃下干燥？葡萄糖中的水分是吸湿水还是结晶水？ 8、因为葡萄糖中的水分是吸湿水，在98~105℃下可以使之汽化除去，并且该温度不致使葡萄糖碳化。 称量瓶或表面皿或培养皿1套 烘箱，10mL移液管 G= (g) 浓盐酸 = （mL） 标准液葡萄糖浓度 C= g/mL 11、为什么加5 - 8mL浓HCl？ 可以防止微生物生长。 (4)6mol/L盐酸溶液*： 配100mL6mol/L盐酸：吸取258.00mL 36