蔬菜中维生素c的测定技巧.docVIP

蔬菜中维生素c的测定 制作人：薛钦 时间：2016年5月20日 一、实验背景 维生素C又叫抗坏血酸，是一种水溶性维生素。食物中的维生素C被人体小肠上段吸收。一旦吸收，就分布到体内所有的水溶性结构中，正常成人体内的维生素C代谢活性池中约有1500mg维生素C，最高储存峰值为3000mg维生素C。正常情况下，维生素C绝大部分在体内经代谢分解成草酸或与硫酸结合生成抗坏血酸-2-硫酸由尿排出；另一部分可直接由尿排出体外。 维生素C的作用： 1、促进骨胶原的生物合成。利于组织创伤口的更快愈合。 2、促进氨基酸中酪氨酸和色氨酸的代谢，延长肌体寿命。 3、改善铁、钙和叶酸的利用。 4、改善脂肪和类脂特别是胆固醇的代谢，预防心血管病。 5、促进牙齿和骨骼的生长，防止牙床出血，防止关节痛、腰腿痛。 6、增强肌体对外界环境的抗应激能力和免疫力。 7、水溶性强抗氧化剂，主要作用在体内水溶液中。 二、实验目的 1.人类营养中最重要的维生素之一。缺乏时引起坏血病。 2.维生素C含量可作为植物抗衰老和抗逆境的重要生理指标，也可作为果品质量、选育良种的鉴别指标。 3.水果、蔬菜保鲜贮藏必须测定维生素C含量，了解果蔬品质量的高低。 4.了解和掌握2,6-二氯酚靛酚测定维生素C含量的原理和方法。 三、实验原理 2，6—二氯靛酚是一种染料，其颜色反应表现为两种特性。一是取决于氧化还原状态，氧化态为深蓝色，还原态为无色；二是受其介质酸度的影响，在碱性介质中呈深蓝色，在酸性溶液介质中呈浅红色。? 用蓝色的碱性染料标准液，滴定含VC的酸性浸出液，染料被还原为无色，到达终点时，微过量的2、6—二氯靛酚染料在酸性溶液中呈浅红色即为终点。从染料消耗量即可计算出试样中还原型抗坏血酸量。 2.6-二氯酚靛酚滴定法 维生素C: 强的还原性 将染料2.6-D 还原成无色的2.6-二氯酚靛酚 2.6-二氯酚靛酚:强的氧化性 中性/碱性: 蓝色 酸性:红色 氧化型2.6-二氯酚靛酚（红色） 氧化型2.6-二氯酚靛酚（蓝色） 还原型2.6-二氯酚靛酚 （无色） 四、不同的测定方法、 目前研究维生素C测定方法的报道较多,有关维生素C的测定方法。 荧光法。 2，6-二氯靛酚滴定法。 2，4-二硝基苯肼法。 分光光度分析法。 碘量法。 荧光法 原理?:? 样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺反应生成具有荧光的喹喔啉,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。?? 脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与邻苯二胺反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。本方法的最小检出限为0.022?g/ml。 本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。 2，4-二硝基苯肼法 原理??: 总抗坏血酸包括还原型、脱氢型和二酮古乐糖酸。样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，再与2，4-二硝基苯肼作用生成红色脎，脎的含量与总抗坏血酸含量成正比，进行比色测定。 本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。 碘量法 原理 : 维生素C包括氧化型、还原型和二酮古乐糖酸三种。当用碘滴定维生素C时，所滴定的碘被维生素C还原为碘离子。随着滴定过程中维生素C全被氧化，所滴入的碘将以碘分子形式出现。碘分子可以使含指示剂（淀粉）的溶液产生蓝色，即为滴定终点。 由于维生素C分子中的烯二醇基有极强的还原性，能被碘氧化，用碘滴定VC。 分光光度分析法 原理： 维生素C在空气中尤其在碱性介质中极易被氧化成脱氢抗坏血酸。 通过吸收光谱曲线法确定维生素C的水溶液的最大吸收波长为267nm，进而通过工作曲线法快速测定蔬菜水果中维生素C的含量。 本方法与常规方法比较，具有准确、快速、稳定、试剂易得等优点。 五、仪器试剂与样品 新鲜生菜 滴定管、三角瓶、研钵、量筒、移液管 离心机 20g/L草酸溶液：称取20g草酸，加水至1000mL。 60g/L碘化钾溶液。 0.001mol/L?KIO3标准溶液。 2，6-二氯酚靛酚溶液。 1mg/ml抗坏血酸标准溶液。 六、实验步骤 2，6-二氯酚靛酚标准液的标定 吸取1mg/ml抗坏血酸溶液1ml置于锥形瓶中，加10ml 20g/L草酸，摇匀，用2，6-二氯酚靛酚滴定至溶液呈淡红色。在15s不消失为终点。计算出1ml染料相当于多少毫克抗坏血酸（取10ml 20g/L草酸作空白对照）计算滴定度T： 维生素C的提取和测定 1、称取10 g新鲜生菜样品，置研钵中，分次加20ml 20g/L草酸，研成匀浆，用的20g/L草酸定容100ml。通过纱布过滤后取10ml放于离心机中3000r/min离心10min,吸