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[DxI800培训--DxI原理及定标[DxI800培训--DxI原理及定标[DxI800培训--DxI原理及定标
DxI800原理概述
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概述
DxI800是目前世界上最先进,效率最高的全自动化学发光分析仪
用于多种体液微量物质的定量、半定量以及定性试验
采用顺磁性颗粒,碱性磷酸酶激发的AMPPD,RV穿梭系统,试剂盒覆膜技术等
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分析技术的关键点
分析模式
检测技术
分离技术
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免疫标记物发展
放射性同位素(Radioisotopes) - RIA
优秀的灵敏度,抗干扰能力好
效期短,重现性差,手工操作,分析时间长,污染物的处理等
荧光素(Fluorophores) - FIA
稳定,较好的灵敏度和重现性
其它荧光物的干扰,线性范围窄
酶(Enzymes) - EIA
非常容易使用
对定量分析所要求的灵敏度和宽线性难以实现
化学发光物质 - CLEIA
优秀的灵敏度和宽线性,抗干扰能力好
类型 – 闪烁型(flash),辉光型(glow)
稳定性依据分子结构会有不同表现
试剂效期
开瓶效期
定标周期
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目前常见的免疫分析发光物质
鲁米那:1928年,早期开发的发光标记物
吖啶酯:直接化学发光,闪烁型
吖啶甲酰胺:直接化学发光,闪烁型
三联吡啶钌:电化学发光,闪烁型
AMPPD:酶促化学发光,辉光型
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AMPPD化学发光系统
+
*
光子(477nm)
AP
O
O
OCH3
OPO32-
O-
O
O
OCH3
为什么Beckman采用AMPPD
3-(2-螺旋金刚烷-4-甲氧基-4-甲基-4-(3-磷酸氧基)-苯基-1,2-二氧乙烷(AMPPD)
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为什么Beckman采用AMPPD
P.A. Bonini et al. “Immunoassay systems”标记物类型 标记物名称 可达到的检测限(/L) 放射性同位素 3H 5x10-15 mole 125I 5x10-17 mole酶 Beta-galactosidase 1.5x10-16 mole Horseradish peroxidase 3x10-16 mole Alkaline phosphatase 5x10-17 mole生物发光 Firefly luciferin/luciferase 5.6 x 10-16 photons/min/mg Enzyme enhanced 10-19mole Firefly luciferin/luciferase 10-19mole荧光 Europium(III) ion 2x10-17 mole Fluorescein 10-13 mole 酶/chemiluminescence Peroxidase/luminol/enhancer 10-15 mole Glucose-6-phosphate dehydrogenase peoxidase/ 10-18 mole isoluminol * AMPPD 10-21 mole
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