外源基因表达系统试题.pptVIP

* * 从2000年以后，哺乳动物细胞表达系统更受重视。目前，美国418种在研药物中约70%是以哺乳动物细胞表达的。在FDA已批准上市的生物技术药物中，哺乳动物细胞表达的产品占70%以上。 * * 一.用于哺乳动物细胞表达的载体 病毒载体： （1）含有能够被真核细胞识别的有效启 动子 （2）在感染周期中能够持续复制，达到很 高的拷贝数。 （3）控制自己复制的元件 （4）有些载体可高效稳定地整合到寄主基 因组上 （5）外壳蛋白识别细胞受体，可将外源基 因高效导入受体细胞。 * * 1.SV40病毒载体 SV40：猿猴空泡病毒（Simian vacuolating virus 40, SV40) 环型双链DNA分子，含5243bp。 * * 重组的病毒-质粒载体 含有完整的早期区段和复制起点的病毒-质粒载体： 病毒的早期区段和复制起点+大肠杆菌的质粒分子重组而成。 例如：p?C10＝早期区段和复制起点（多瘤病毒）＋质粒pBR322 这种载体既可在大肠杆菌中复制，也可在哺乳动物细胞中复制，称之为穿梭载体。 * * 2.反转录病毒载体 宿主范围广，感染动物或人的细胞。 具有强启动子 不引起宿主细胞的死亡，可以维持许多代 * * 第四节 外源基因导入宿主细胞的物理化学方法参见教材第六章P121页 * * 1.磷酸钙沉