色谱分析法实验.docVIP

第5章　色谱分析法 5.1 气相色谱分析法 5.1.1　概述 色谱是一种现代分离分析技术。气相色谱(Gas Chromatography)是以气体作为流动相，当它携带欲分离的混合物流经固定相时，由于混合物中各组分的性质不同，与固定相作用的程度也有所不同，因而组分在两相间具有不同的分配系数，经过多次的分配之后，各组分在固定相中的滞留时间长短不同, 从而使各组分依次先后流出色谱柱而得到分离。 气相色谱仪是一个载气连续运行、气密的气体流路系统。气路系统的气密性、载气流速的稳定性及测量的准确性，都影响色谱仪的稳定性和分析结果。图是气相色谱仪的流程图。Wheatstone）电桥的两臂，利用含有样品气的载气与纯载气热导率的不同，引起热敏丝的电阻值发生变化，使电桥电路不平衡，产生信号。将此信号放大并记录下来就得到一条检测器电流对时间的变化曲线，通过数据处理系统或色谱工作站便得到了一张色谱图。 图5-1 气相色谱仪示意图 色谱谱中每个峰均代表样品中的组分。对应每个峰的时间是各组分的保留时间。所谓保留时间，就是一个化合物从注入时刻起到流出色谱柱所需的时间。当分离条件给定时，就像薄层色谱中的Rf 样，每一种化合物都具有恒定的保留时间。利用这一性质，可对化合物进行定性鉴定。在做定性鉴定时，最好用已知样品做参照对比，因为在一定条件下，有时不同的物质也可能具有相同的保留时间。色谱图上色谱峰的高度或峰面积可用于定量分析。 5.1.2　气相色谱仪的使用方法与维护 5.1.2.1 通用注意事项： (1)钢瓶及气源 ① 钢瓶及减压阀要经常检漏。 ② 在使用空气压缩机时要定期放水，更换干燥剂。 ③ 钢瓶总压2.0 Mpa 时，更换新钢瓶。 (2) 电源 需配制稳压电源，同时有良好的接地设施。 (3) 进样口 ① 定期更换进样垫。 ② 进样口内的玻璃衬管要定期清洗，进样口需注意分流及不分流两种衬管，衬管内最好加石英棉。 ③不用的进样口和检测器要用死堵堵好。 (4)色谱柱的安装 毛细柱两端切口要平齐，长时间不用或新的毛细柱两头要切掉2 cm 左右，再分别接进样口、检测器。两边长度参照带有标识的石墨调节器即可。 (5) 色谱柱的老化 接进样口，不接检测器，最好用程序升温老化色谱柱，老化的最高温度要高于平时使用温度20℃以上而低于柱子的最高使用温度。老化时间不低于1.5 h。载气流速应与测定样品时保持一致。 (6) 每次开机前，进行以下检查： ①压力表指示的供气压力是否正确。 ② 气体过滤器是否失效。 ③电源电压是否符合说明书要求。 ④仪器高温部位是否放置有易燃易爆物品。 ⑤各连接线路接头是否脱落或松动。 ⑥各控温设定值是否正确。 (7) 分析工作中的注意事项 ① 建立工作报告，对样品来源、分析工具、操作者、仪器运行状况、分析时间作完整记录，以备拷贝； ② 定期活化色谱柱； ③ 定期检漏； ④ 杜绝分析来源不明样品； ⑤ 杜绝明火，严禁抽烟。 5.1.2.2 GC-2010气相色谱仪的使用方法与维护 (1)开机步骤，如采用FID检测器 ①打开气源，载气（N2/He）：0.7 Mpa，H2：0.2～0.3 Mpa，Air：0.3～0.4 Mpa。 ②打开GC和计算机的电源。 ③在计算机桌面上打开Real Time Analysis 快捷键，进入时实分析窗口。 ④打开System Configuration 进行自动进样器、进样口、色谱柱、检测器的配制，在此窗口需设置载气、尾吹气种类；柱参数（柱长、内径、膜厚、最高使用温度）输入及色谱柱的选择；样品瓶（４mL、1.5 mL）、进样针（10 μL、50 μL、250 μL）大小的选择，设定完毕，回到System Configuration 窗口，点击SET 键确认。 ⑤仪器参数的设定：先设柱温（可做程序升温），再设进样口温度、柱流量及分流比，检测器温度、Ｈ2、Air 流量。（通常Ｈ2：47 mmin、Air：400 m/min）。 ⑥ 用鼠标点File 菜单找到Save Method File As 输入你想保存的方法文件名（如果硬件配置相同的话，可以直接调用此方法）。 ⑦如沿用上次关机前的配制，直接在③步的窗口下用鼠标点File 菜单找到Open Method File，打开需要的方法文件名。 ⑧点击Download Parameters ，再点击System On。 ⑨ 等FID 检测器温度升到160℃以上时，点火，点击Flame On。 ⑩等仪器稳定后，进行Slope Test，出现对话框点OK 即可。 没配备自动进样器的直接点Single Run Sample Login 出现样品注话框，样品名、数据文件名、样品重量等输完后，点确定键。再点一下Sta