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* 清溪中学 陈华毅 酵母细胞的固定化 通过课题背景分析,你有何体会? 酶: 固定化酶: 固定化细胞: 优点: 实际问题: 设想: 催化效率高,低耗能,低污染 ①对强酸、强碱、高温等环境条件敏感,易失活; ③反应后酶混在产物中,如不去除,会影响产品的品质. 将酶固定在不溶于水的载体上. ②溶液中的酶很难收回,不能被再次利用,提高了生产成本; 酶既能与反应物接触,又容易与反应物分离,同时,还可以反复利用. 优点: 实际问题: 一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实践中,很多产物的形成都是通过一系列的酶促反应才能完成的. 酶是细胞合成的,能否将合成酶的细胞直接.固定? 成本低,操作更容易. 设想: 优点: 阅读P49,并思考: 1、解决酶应用中存在问题的方法是什么? 2、这种方法的优点是什么? 3、什么是高果糖浆?使用它有何好处? 4、生产高果糖浆需要什么酶?其作用是什么?这种酶有何特点? 5、了解高果糖浆生产过程。 一、固定化酶的应用实例 固定化酶技术。即将酶固定在一定空间内的技术(如固定在不溶于水的载体上)。 (1)使酶既能与反应物接触,又能与产物分离; (2)固定在载体上的酶可以被反复利用。 1、解决酶应用中存在问题的方法是什么? 2、这种方法的优点是什么? 3、什么是高果糖浆?使用它有何好处? 一、固定化酶的应用实例 高果糖浆是果糖含量为42%左右的糖浆。作为蔗糖的替代品,高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管病,对人的健康有利。 4、生产高果糖浆需要什么酶?其作用是什么?这种酶有何特点? 生产高果糖浆需要葡萄糖异构酶; 其作用是将葡萄糖转化为果糖; 这种酶稳定性好,可持续发挥作用。 5、了解高果糖浆生产过程。 注意反应柱的各部分名称。 你能说出反应柱的优点吗? 反应柱能连续使用半年,大大降低了生产成本,提高果糖的产量和质量。 思考:在生产实际中使用固定化酶技术有什么不足?有什么解决办法? 一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实际中很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能进行,所以操作比较麻烦。 不足: 解决办法: 可采用固定化细胞技术。 1、什么是固定化酶或细胞技术? 阅读P50内容,思考以下问题: 二、固定化细胞技术 2、细胞(或酶)固定化的常用方法有哪些? 3、酶和细胞固定方法的选择及原因? 4、固定化细胞常用的不溶于水的多孔性载体有哪些? 二、固定化细胞技术 1、什么是固定化酶或细胞技术? 2、细胞(或酶)固定化的常用方法有哪些? 利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术。 包埋法 将酶(或细胞)包埋在细微网格里 化学结合法 将酶(或细胞)相互连接起来 吸附法 将酶(或细胞)吸附在载体表面 2.固定化酶和固定化细胞的联系与区别 联系:应用相同,都能催化某些反应 区别: (1)固定化细胞技术操作容易,成本低,容易回收; (2)固定化细胞技术对酶活性影响更小; (3)固定化细胞固定的是一系列酶; (4)由于大分子难以通过细胞膜,因此固定化细胞的应用有一定的限制; 3、酶和细胞固定方法的选择及原因? ①酶适合采用化学结合和物理吸附法固定 ②细胞适合采用包埋法固定 (1)方法 (2)原因 ①细胞体积大,酶分子很小 ②体积大的细胞难以被吸附或结合,而体积小的酶容易从包埋的材料中漏出 4、固定化酶和固定化细胞常用的载体材料 明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、聚丙烯酰胺等 (其共同的特点是不溶于水的多孔性载体) 1.从操作角度来考虑,你认为固定化酶技术与固定化细胞技术哪一种方法更容易?哪一种方法对酶活性的影响更小? 固定化细胞技术 固定化细胞固定的是一系列酶 固定化细胞技术 固定化酶技术 2.固定化细胞固定的是一种酶还是一系列酶? 3.如果想将微生物的发酵过程变成连续的酶反应,应该选择哪种方法? 4.如果反应物是大分子物质,又应该选择哪种方法? 思考 (大分子物质不能进入细胞) (一)制备固定化酵母细胞 阅读P50~51思考下列问题: (1)制备过程包括哪几个步骤? (2)你认为哪个步骤的操作是最重要的一环? (3)各步骤应当分别注意什么问题? 1、酵母细胞的活化 思考: 关于酵母菌你有哪些知识? (一)制备固定化酵母细胞 什么是活化?其本质是什么? 活化的方法是什么?具体操作过程? 操作过程中应注意什么? 1、酵母细胞的活化 (一)制备固定化酵母细胞 本质: 方法: 活化:让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态。 加快新陈代谢。 加入适量的水。 操作过程: 注意事项: 取1g干酵母,放入50ml的小烧杯中,加入蒸馏水10ml,用玻璃棒搅拌,使酵母细胞混合均匀,成糊状,放置1h左右使其活化。 (1)所用容器要大
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