血凝仪器发展综述.docVIP

Sysmex株式会社CA系列全自动凝血分析仪 几乎所有检测血液凝固的现有基本原理都是在1900年的前半年提出的，但现代止血与血栓分析仪器的雏形出现于50年代。当时对于止血/血栓的检测完全依赖人工方式，由于这种方法不同检验员得到的测试结果差别较大，同时要求检验员具有很高的操作熟练程度，因此，迫切需要实现测试的自动化。在这种理念下，开发出了最早的运用电流法原理的半自动化操作仪，其主要还是模拟手工凝固时间的测定方法。60年代出现了光学浊度法的凝血仪。但是，血凝仪的真正发展与普遍使用乃是始于微电子技术、免疫化学技术迅速发展的70-80年代，使运用光学浊度法的血凝仪日趋完善。一系列血液凝固自动测试仪的开发，使得止血/血栓的检测更为准确、迅速，显著提高了实验的精度。Sysmex株式会社（日本希森美康株式会社），原名日本东亚医用电子株式会社（TOA Medical electronics Co.LTD）,是一家集先进的血球计数仪、尿沉渣分析仪与凝血仪生产于一体的跨国公司，素以产品精湛、技艺超群而闻名于世。本公司致力于研究开发全自动凝血仪，并于1984年首次推出了CA-100凝血分析仪以来，有CA-3000、CA-4000、CA-5000、CA-1000、CA-6000、CA-500、CA-1500、CA-50及CA-7000等一系列CA产品陆续投放市场。公司生产的全自动凝血分析仪因品种繁多、性能卓越而受到广大检验工作者的普遍欢迎，能满足不同层次使用单位的要求，在众多同类产品中成为凝血机制检查的首选。尤其欣慰的是，Sysmex公司与Dade Behring 公司长期合作，实现了试剂优选的目标。强强联手，真正地将凝血机制的实验室检查推进到了一个崭新的阶段。以下对CA各系列产品作一介绍。Sysmex公司在血液凝固分析仪器领域中最初上市的产品CA-100是一种单通道的半自动仪器。引进微电子技术后，对异常标本也能进行高性能的测试，同时具有操作简便的优点。因此，目前该技术仍应用于许多设备中。本仪器的测试原理采用了光学法中的散射比浊法，主要是根据待测样品在凝固过程中散射光的变化来确定检测终点。在该方法中检测通道的单色光源与光探测器呈90°直角，当标本中加入凝血激活剂时，起初在标本中并未发生很大的散射光变化，随着反应的进行，纤维单体的聚合作用加速，反应液产生白浊现象，从而使散射光强度增加。用超高辉度二极管（光源660nm）照射上述反应液，将90°角方向的散射光量转换为电信号，并将信号的变化描绘成凝固曲线，当标本完全凝固以后，散射光量不再变化。另外，仪器还采用了百分比终点测试法，即把标本中加入试剂后最初散射光量设为0%，把反应结束后不再变化的散射光量设为100%，并将与50%散射光量相对应的时间作为凝固时间进行测定。50%的部位是单位时间内散射光量的变化最为显著、纤维蛋白的单体聚合反应速度最快的部位。由于引入了百分比终点测试的方法，预先扣除了标本、试剂的本底，然后再检测由于凝固而致的散射光强度的变化，因此即使对于临床常见的最初光量水平较高的溶血性标本、黄疸、脂血标本，或者散射光强度较低的低纤维蛋白标本，均能进行更准确的测定，具有较强的抗本底干扰能力（图1）。所有CA系列的血液凝固分析法均采用了这种测试方法。???? 1990年Sysmex公司开发出全自动血液凝固分析仪CA-5000，它使直到当时CA系列一贯采用的试剂和血浆量（与人工测试法等量）半量化，大幅度地降低了检测成本。从此，试剂和血浆的半量化成为血液凝固分析领域里的主要趋势。另外，CA-5000还可同时测定5项参数，真正实现了高速处理。CA-5000的研制成功使Sysmex公司在国内凝固测试仪器领域中占据了领先地位。1992年，为实现仪器的中、小型化，公司又开发出将CA-5000进一步小型化的产品CA-1000。??? ?在中国，广泛使用CA系列血液凝固分析仪是从1997年Sysmex公司开发的CA-6000开始的，下面对这一系列在中国应用最普遍的仪器作详细介绍。??? ?CA-6000在凝固法的基础上有应用了发色底物法和免疫法测定原理。????一、基于发色底物法的测试系统用于酶的测定，它包括下列两种方法： 即在蛋白酶和发色底物进行一定时间的反应后——????????1、用反应终止液使反应停止，将此时的吸光度作为绝对量用比色计测定，从而求出其活性量的终点法。????2、将一定时间内的吸光度变化量作为反应速度，从而求出其活性的动态法。????所需试剂种类及试剂添加量较少的动态法广泛应用于自动测试中。CA-6000 采用该种动态法进行全自动测试，其原理是：通过人工合成与自然凝血因子有相似的一段氨基酸排列顺序、还有特定作用位点的小肽，并将可水解产色的化学基团——对硝基苯胺（PNA）与