苯酚硫酸法标准曲线 苯酚硫酸法测定多糖.doc

苯酚硫酸法标准曲线 苯酚硫酸法测定多糖 导读：就爱阅读网友为您分享以下“苯酚硫酸法测定多糖”的资讯，希望对您有所帮助，感谢您对92的支持! 苯酚—硫酸法测定党参总糖 1．材料与方法 1．1 材料与试剂，仪器 1.1.1 材料、试剂 党参（肉党、普通纹党、产于中寨的纹党）；95％乙醇；苯酚；浓硫酸均为分析纯。 1.1.2 仪器与设备 FA-2400分析天平，101A型电热鼓风干燥箱，Mb型可调式电热板，电热恒温水浴锅，SK5200H超声清洗器，UV-9100紫外-可见分光光度计 1.2 方法 1.2.2 供试品溶液的制备 取党参粉末2g，置圆底烧瓶中，加95％乙醇3次（20.20.20ml）每次2h,过滤，蒸干乙醇，残渣用水溶解，在电热板上加热，提取3次（50.50.50ml）,每次2h，过滤，滤液置于50ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度摇匀。 1.2.3 标准溶液的配制 精密称取105干燥至恒重的D-无水葡萄糖10mg置于100 mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度摇匀，得0.1mg／mL的储备溶液，备用。 1.2.3 5％苯酚溶液的制备 精确量取6.3ml 80％的苯酚溶液转移至100ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀后置于棕色试剂瓶中，备用。(实验室苯酚为师姐配好的80％的溶液，避光密封保存于冰箱中，用时水浴加热使其成为透亮的溶液) 1.2.4 标准曲线的制备 精确吸取葡萄糖标准液0、1、2、3、4、5、6 mL，分别置于10 mL容量瓶中，以蒸馏水补至 10 mL摇匀，依次吸取2ml加入试管中，加入苯酚液1.0 mL和浓硫酸5.0 mL，混匀，在室温放置30 min后，于波长490 nm处测定吸光度值。以吸光度值为纵坐标，葡萄糖浓度为横坐标绘制标准曲线。 (10*10-2mg.ml*1/10=10*10-3mg.ml-1=10?g/ml.0.60) 1.2.5 样品的测定 准确吸取供试品溶液0.1 mL加水定容至10mL，精确吸取此稀释液2mL于试管中，按标准曲线制备的方法测定吸光度值，并根据回归方程，求得其浓度，计算样品中总糖的含量。（党参溶液的浓度=2/50*0.1/10=1/2500g.ml-1=1/2.5 mg.ml-1=400?g.ml-1） 2 结果与分析