第十五章色谱法导论讲述.ppt

分 析 化 学（仪器分析） 概述 色谱法又称色层法或层析法，是一种比萃取、蒸馏等更高效、应用更广泛的分析技术。 色谱法早在1906年由俄国植物学家Tswett分离植物色素时采用。 他在研究植物叶的色素成分时，将植物叶子的萃取物倒入填有碳酸钙的直立玻璃管内，然后加入石油醚使其自由流下，结果色素中各组分互相分离形成各种不同颜色的谱带。这种方法因此得名为色谱法。以后此法逐渐应用于无色物质的分离，“色谱”二字虽已失去原来的含义，但仍被人们沿用至今。 在色谱法中，将填入玻璃管或不锈钢管内静止不动的一相（固体或液体）称为固定相 ； 自上而下淋洗运动的一相（一般是气体或液体）称为流动相 ； 装有固定相的管子（玻璃管或不锈钢管）称为色谱柱。 色谱法的实质 色谱法的实质是一种物理化学分离分析方法。基于混合物中各组分在互不相容的两相中，具有不同的分配系数，当两相做相对运动时，混合物各组分在两相间进行反复多次的分配。这样就使得那些分配系数只有微小差别的组分在移动速率上产生差别，从而得到分离。 色谱法的分类 1. 按两相物理状态分类 气固色谱(GSC)、气液色谱(GLC)、液固色谱(LSC)、液液色谱(LLC) 2. 按固定相的固定方式状态分类 (1)柱色谱：填充柱色谱和毛细管柱色谱--固定相安装在柱内或柱壁上。 (2)薄层色谱：将固定相涂在玻璃板或塑料板上。 (3) 纸色谱：用滤纸做固定相或固定相载体。 3. 按分离机理分类 (1)吸附色谱：利用吸附剂对不同组分的吸附性能的差别而进行分离 (2)分配色谱：利用不同组分在两相间的分配系数的差别而进行分离 (3)其他：离子交换色谱，凝胶色谱，离子对色谱，配合色谱，亲和色谱。 4. 其它色谱类型 基于色谱过程的特殊物化原理或特殊的操作方式等，色谱法还有其他一些特殊类型，如化学键合色谱、制备色谱、裂解色谱、二维色谱等。 色谱的发展 从Tewett建立色谱法至今，色谱法已成为专门的学科。 1952 James和Martin发展了气相色谱；是色谱法的革命性进展。 1967 Kirkland等研制高效液相色谱法；再一次推动了色谱法的发展。 色谱法的特点 1.分离效率高，可用于分离复杂化合物 2.灵敏度高，可以检测到ug/g至ng/g级的物质含量。 3.分析速度快 4.应用范围广：气相色谱--沸点低于400度；液相色谱--高沸点、热不稳定、生物试样。 5.不足：被分离组分的定性问题 第一节 色谱基本概念 一、色谱分离过程 二、色谱常用术语 1.色谱图 色谱柱中的流出物通过检测器产生的信号对时间（或流动相体积）的曲线 在适当的色谱条件下，每个组分对应的色谱峰一般呈正态分布，色谱图是定性、定量和评价色谱分离情况的基本依据。 2.基线 色谱柱中只有载气无样品通过时，检测器响应信号反应的是系统噪音随时间变化的线称为基线。在实验条件稳定时，基线是一条直线。 3.峰高 色谱峰最高点与基线之间的距离 4.区域宽度 色谱峰的区域宽度是色谱流出曲线的重要参数之一，用于衡量柱效率及反映色谱操作条件的动力学因素。表示色谱峰区域宽度通常有三种方法。 1.标准偏差?---即0.607倍峰高处色谱峰宽的一半(高斯曲线)。 2.半峰宽Y1/2---即峰高一半处对应的峰宽。它与标准偏差的关系为 Y1/2=2.354? 3.峰底宽度Y---即色谱峰两侧拐点上的切线在基线上截距间的距离。它与标准偏差?的关系是 Y = 4 ? 5.保留值 试样各组分在色谱柱中保留行为的量度，反映了组分与固定相间作用力大小，通常用保留时间和保留体积表示。可以揭示色谱过程的作用机理和分子的结构特征。 (1)保留时间tR 试样从进样到柱后出现峰极大点时所经过的时间，称为保留时间，是色谱定性的依据。 (2)死时间t0 不被固定相吸附或溶解的物质进入色谱柱时，从进样到出现峰极大值所需的时间称为死时间，它正比于色谱柱的空隙体积，如下图。 (4)保留体积VR 指从进样开始到被测组分在柱后出现浓度极大点时所通过的流动相的体积。保留时间与保留体积关系： VR= tR qo(色谱柱出口的载气流量) (5)死体积V0 指色谱柱在填充后，柱管内固定相颗粒间所剩留的空间、色谱仪中管路和连接头间的空间以及检测器的空间的总和。当后两项很小可忽略不计时，死体积可由死时间与色谱柱出口的载气流速qo（cm3·min-1）计算。 (6)调整保留体积VR?