I动物实验的常规操作.docVIP

动物实验的一般操作 实验过程中技术及生物材料的收集是否恰当，直接影响实验结果的质量。因此，实验人员必须正确地掌握动物实验中的一般操作技术，包括动物的捉拿、固定、性别鉴定、标记、生物材料的收集、处死方法和解剖检查，这是保证实验工作成功的基本条件之一。 ? 一、实验动物的捉拿固定??? 实验动物的正确捉拿和固定，不但可以避免由于过强的刺激和动物的损伤而影响观测结果的正确性，而且还可防止被动物咬伤，从而保证实验的顺利进行。常用的小鼠、大鼠及家兔的捉拿固定方法如下：??? （1）小鼠?? 用右手抓住鼠尾，提出后立即放在铁丝笼或粗糙的板面上，而后右手将小鼠缓缓后拉，恰好与鼠要向前爬行的力相反而使其固定，此时可用左手的姆指和食指捏住小鼠耳后枕颈部皮肤即可提起，掌心向上而将鼠体置于掌心中，用无名指和小指将鼠尾压住。此时小鼠即被固定好，可以进行各种实验操作。操作熟练后，可采用左手一手抓取法，更为方便，右手可不必放下注射器等器具。 （2）大鼠 捉取大鼠时，不宜突然袭击式地去抓它，这样手指容易被咬伤。取用时，应轻轻抓住其尾巴后提起，置于实验台上，将其放入大鼠固定盒将鼠固定，这样可进行尾静脉取血或注射。如要作腹腔注射或灌胃操作时，实验者应戴上帆布手套，右手轻轻抓住大鼠的尾巴向后拉，左手抓紧鼠二耳和头颈部的皮肤，并将鼠固定在左手中，右手即可进行操作。 ? （3）家兔 家兔性情一般较温顺而胆小，捉拿动作要轻。家兔二耳较长，但并不能承担全身重量，因此捕捉家兔不能抓其两耳，使它疼痛而挣扎。从笼内捉兔时，先轻轻打开笼门，勿使受惊，随之将手伸入宠内，从头前阻拦它跑动，兔便匍伏不动，此时用右手把二耳轻轻地压于手心内，抓住颈部的被毛与皮，提起兔，然后用左手托住它的臂部，兔身的重量大部分落于左手上。家兔的固定按实验要求而定，如在耳血管采血、注射、观察瞳孔及呼吸变化时，可将家兔装入能使头部露出的特制木箱。做心脏抽血时，可将其仰卧固定在简易木质手术台上，头部用特制兔头夹固定，四肢用活结粗棉扁带缚在台边。 二、实验动物的标记方法 确定作为实验用的动物，应分别进行编号登记。选择何种编号、登记的标记方法，则依据实验动物数量、观察时间长短而定。 （1）皮毛涂色法 常用于大鼠、小鼠、豚鼠等实验动物。即以苦味酸饱和酒精溶液（黄色）代表个位数；中性红（或品红）溶液（红色）代表十位数，涂在动物体表特定部位的皮毛上，不同部位代表不同数目，如下图1-2所示。 （2）剪耳标记法 在动物耳朵边缘不同部位剪口或耳朵不同部位剪一小孔，以代表一定的数序。此种标记方法清楚，保存时间长，适用于较长期进行试验观察时采用。 （3）烙印法 用刺激钳在动物耳上刺上号码，然后用棉签蘸着溶在酒精中的墨黑在刺号上加以涂抹，烙印前最好对烙印部位预先用酒精消毒。 （4）用金属制的号牌固定于实验动物的耳上，大动物可系于颈上 对于猴、狗、猫等大动物有时可不做特别标记，只记录它们的外表和毛色即可。 三、实验动物性别鉴别 受试物不同性别可有不同的毒性作用，或由于目的要求不同，往往需选用不同性别的动物进行试验观察。 大鼠和小鼠的性别鉴定，见实验表1－l。 实验表1－1? 雌鼠和雄鼠的鉴别 雄? 性（♂） 雌? 性（♀） 备 注 生殖器离肛门较远，阴部有毛 生殖器呈圆尖形突出 会阴处有睾丸，有时升入腹腔 生殖器离肛门较近，生殖器和肛门间无毛 生殖器呈圆形且有凹槽和阴道开口 胸腹部有明显的乳头（大鼠6对，小鼠5对） 仔鼠性别主要以生殖器距肛门远近来鉴别，雄性距离远，雌性距离近 四、实验动物的分组 实验时，在动物数量较多的情况下，必须进行分组。为避免主观上有意或无意地偏见，减少因其他个体因素带来的偏差，使实验结果比较准确可靠，因此，实验动物均应采用随机分组的方法。常用的随机分组方法有： （1）随机区组法 例如欲将42只大鼠分配于7个组内，每组6只鼠，可按如下方式进行。将大鼠逐个称体重，体重接近的7只鼠同置于一笼中（每鼠作上记号并登记体重）为一个区组。共计6个区组，然后从1～7号编7个签，于第一宠内任取一鼠，同时抽签得3号，此鼠则放入第3组内，依次抽完7个签，则第一笼内大鼠随机分配于7个组内。第二到第六笼大鼠按同样方法抽签分配于实验组。这样各组动物分配比较均匀，平均体重亦很接近。 （2）“随机数字表”分组法 该分组法比较麻烦，建议使用第一种。 如有动物18只，按其体重轻重次序编号为1，2，3，4…18号，试用随机方法将其分配到甲、乙、丙三组中去。 查“随机数字表”得18个数宇，各数字一律以3除之，将余数为第3行，余数1者分入甲组，余数2者分入乙组，除尽者写上除数3，分入丙组，结果如下表1－2所示。 实验表1－2? 完全随机设计举例（分3组） 动