市售陈皮中橙皮甙的含量测定及陈皮质量估定..docVIP

市售陈皮中橙皮甙的含量测定及陈皮质量估定 摘 要 陈皮为芸香科植物橘（Citrus reticulate Blanco）及其栽培变种的干燥成熟果皮，，，，Citrus reticulate Blanco）及其栽培变种的干燥成熟果皮，Hesperidin）。橙皮甙是陈皮的主要有效成分[2]，在医学上可用于维持血管正常渗透压，具有抗菌、抗氧化、抗癌等功效[3-4]，《中华药典2010》中规定陈皮中橙皮甙含量不得少于3.0%。以此参考，橙皮甙含量的多少可作为陈皮质量估定的重要指标。 但是，由于陈皮质量与其原材料（即橘的品种）和保藏时间有关，采集加工分散，加之某些药店为了降低成本，采购质量低下的陈皮出售，导致市场流通、药店贮配的药材质量参差不齐。 2 实验目的 通过对采购自泰安市不同药店的陈皮中橙皮甙含量的测定与分析，对泰安市商品药材陈皮的质量情况进行估定。 3 实验原理 橙皮甙（Hesperidin）又名橙皮苷（Hesperidion）、柑果苷（Citrus），是由一分子橙皮素与一分子的芳香二糖缩水结合而成，其结构式如图1。橙皮甙是一种浅黄色的结晶粉末，几乎无臭无味，分子式为C28H34O15，相对分子量610.55，熔点245-254℃，旋光度为-70°。橙皮甙难溶于水，50L水可溶解1g橙皮甙，几乎不溶于丙酮、乙醚、苯，微溶于乙醇、甲醇及热冰醋酸，可溶于二甲基甲酰胺及甲酰胺，易溶于吡啶、甘油、稀碱[5]。橙皮甙属于双氢黄酮类化合物，存在于柑橘类和中草药（如陈皮、枳实等）中，是维生素P的主要成分，能保持微血管壁正常的渗透性，对心血管疾病有显著疗效。橙皮甙经甲基化后，可配制成多种防止动脉粥样硬化和心肌梗塞的药物[6]。 橙皮甙的提取方法有很多，如热水提取法、醇类提取法、超声波强化提取法、高速逆流色谱法（HSCCC）、超临界二氧化碳萃取法等[7]，其中碱提酸沉法操作简单、陈本低、提取率较高。 橙皮甙的碱液提取主要是利用其所含的两个酚羟基在碱性条件下，与溶液中的阳离子反应生成盐而溶出，然后酸化，冷却，使其从溶液中析出。碱液主要是稀氢氧化钠和石灰水。氢氧化钠水溶液的浸出能力高，但杂质较多不利于纯化。石灰水可以使一些鞣质或水溶性杂质沉淀生成钙盐沉淀，有利于浸液纯化，但是浸出量不如氢氧化钠水溶液好。 橙皮甙的检测方法有库伦滴定法、HPLC 法、TLCS 法、毛细管电泳、紫外分光光度法。其中紫外分光光度法是一种简易，灵敏度高的橙皮甙含量测定方法，测定省时省力高效[8]。 4 实验设备 4.1 仪器 电子天平、pH计、真空泵、紫外-可见分光光度计、电磁炉、布氏漏斗、量筒（100ml、1000ml）、铁架台、漏斗、滤纸、玻璃棒、容量瓶（10ml×4个、50ml×12个、100ml、500ml）、烧杯（100ml×2个、1000ml×2个） 4.2 试剂 DMF溶液、冰醋酸、Ca(OH)2、盐酸溶液、乙醇、NaOH（所用试剂均为分析纯） 4.3 材料 购于两个不同药店的陈皮样品 5 实验材料及试剂 5.1 试剂的配制 5.1.1 Ca(OH)2溶液的配制 分别称取Ca(OH)2固体3.50g于两个1000ml的大烧杯中，并分别溶解于500ml水中，搅匀备用。 5.1.2 1%NaOH的70%乙醇液 准确称取NaOH固体1.00g，量取74ml的95%乙醇溶液（或70ml分析纯标准的乙醇溶液），定容至100ml。 5.1.3 0.1%NaOH的70%乙醇液 准确称取NaOH固体0.50g，量取370ml的95%乙醇溶液（或350ml分析纯标准的乙醇溶液），定容至500ml。 5.2 材料的处理 陈皮样品置于烘箱60℃烘至恒重，用食品粉碎机粉碎，60目过筛，然后保存备用。 6 实验操作步骤 6.1 橙皮甙的粗提 取两个样品各50g，室温下分别加入至500mlCa(OH)2(7g/L)水溶液，Ca(OH)2调pH=12.0，静置2h，抽滤取滤液，用盐酸溶液调节pH=5.0，静置15h（过夜）。抽滤取沉淀，干燥。 6.2 橙皮甙的精提 取粗品橙皮甙，加入10倍的DMF溶液溶解，过滤，加入20倍的含醋酸的沸水（醋酸：水=2.5:100），冷却沉淀，过滤，干燥称重，即得橙皮甙纯品。 6.3 橙皮甙的检测 6.3.1 橙皮甙标准液的制备 准确称取橙皮甙标准品0.0250g，置于50ml容量瓶中，用1%NaOH的70%乙醇液10ml溶解后，用0.1%NaOH的70%乙醇液(以下称碱醇液)稀释至刻度，摇匀。取该溶液5ml，置于50ml容量瓶中，用碱醇液稀释至刻度，摇匀。 6.3.2 空白对照液的制备 吸取1%NaOH的70%乙醇液1Oml于50ml容量瓶中，用碱醇液稀释至刻度，摇匀，取该液5ml置于50ml容量瓶中，用碱醇液稀释至刻度，