微生物基因工程菌分解.pptVIP

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  • 2017-01-12 发布于湖北
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酵母表面展示系统的类型 目前,最常见的酵母表面展示表达系统包括: 凝集素展示表达和絮凝素展示表达。凝集素展示表达系统是将外源基因与酵母编码凝集素C端编码序列(含GPI锚定信号序列)连接后插入质粒载体的信号肽下游, 融合蛋白诱导表达后, 信号肽引导嵌合蛋白向细胞外分泌, 由于融合蛋白C末端存在含GPI锚定信号的凝集素多肽序列,可将蛋白锚定在酵母细胞壁中,从而将蛋白分子展示表达在酵母细胞表面。絮凝素展示表达系统利用絮凝素基因与外源蛋白融合,并将融合蛋白展露表达在细胞表面,此系统又包括两个子系统: GPI锚定系统和絮凝结构域锚定系统。GPI锚定系统是利用絮凝素Flo1p的C末端含有的GPI信号锚定外源蛋白,此系统与凝集素展示相似; 絮凝结构域锚定系统是利用Flo1p的中间絮凝功能结构域与外源蛋白融合,通过絮凝功能结构域识别酵母细胞壁中的甘露聚糖链并非共价作用诱导细胞粘附、聚集成可逆性絮状物。 酵母表面展示与酶技术 酶的固定化是指借助物理或者化学方法将酶固定于特殊的相,使得酶与整体流体分开,但是仍然能够进行底物和效应物分子交换并发挥其催化效能的一种技术。与游离酶相比,固定化酶提高了酶的稳定性,并使酶能够反复回收利用。但是,传统的固定化方法也会产生一些不利因素,例如由于增加固定化操作,导致酶固定化过程中的活性收率损失;另外由于固定化操作需用载体,因而增加了载体成本费和固定化操作费用。 酵母表

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