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应用微生物法试剂盒检测奶粉中维生素B6的含量.
描述:目的 建立应用微生物法试剂盒检测奶粉中维生素B6含量的分析方法。 方法 采用维生素B6微生物检测试剂盒定量检测奶粉中添加维生素B6的含量。 结果 维生素B6的线性范围为0.002~0.012 mg/1...
医学毕业论文
图1?维生素B6的标准曲线? 2.2?方法的精密度分析? 将进行样品处理的4种不同的奶粉样品分别进行6次维生素B6测定,得出不同样品的相对标准偏差(RSD)值(表1)。? 表1?精密度分析(n=6)? 2.3?方法的加标回收率? 将两种不同的奶粉样品,分别加入质量浓度为10、25、50?mg/100?ml的维生素B6标准溶液各10?μl,再按样品处理的步骤进行处理,然后平行测定6次,得到不同样品的加标回收率(表2)。? 表2?加标回收试验(n=6)? 3?讨论? 由于维生素B6是水溶性维生素,在高温、光线直射、空气暴露等环境条件下,会部分降解损失,故在样品提取操作过程中,要尽可能在避光条件下操?作,标准溶液应在冷藏、避光条件下保存并尽快分析。含样品的微孔板在30℃培养箱中避光孵育后,将其放于2~8℃冰箱保存,分别于24、48、72?h取微孔板用酶标仪在620?nm条件下测量浑浊度,结果显示48?h内微孔板中的维生素B6性质稳定。? 加入微孔中的样品提取液,样品稀释液用水,以及实验中需要的其他耗材都必须无菌。样品无菌提取后,也必须在无菌环境中进行操作。要保证黏合膜?和微孔的封闭性,特别注意微孔的边缘部分,防止样品液在振荡过程中相互混合影响测量结果。检测样品前要估算样品中维生素B6的含量进行稀释,稀释过程要准?确,样品的测量OD值在标准曲线中部的结果可信度较高。? 微生物法测定维生素B6的含量近50年来虽然已被广泛地纳入各类国际标准方法中,但在我国应用却很少。微生物法操作繁琐、实验周期长,与目前?分析方法简便、快速、高效的发展方向所不符。因此,微生物检测试剂盒通过优化样品处理、试剂配制、反应条件,省略了菌种保存及种子培养液的制备,能有效地简化实验步骤,排除实验过程中的各种干扰,从而达到节省实验时间、减轻工作量,进而得到准确的定量结果的目的,同时该方法检出限、线性?关系、精密度、加标回收率、稳定性等技术参数能满足奶粉中维生素B6的微量分析的要求,表明该方法可用于测定奶粉中维生素B6的含量,结果令人满意。?
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