编号生物农药研究中心[2010-02-10],共6页.docVIP

编号：生物农药研究中心[], 共页 承担单位：福建省农科院研究所 课题编号： 课题名称： 课题负责： 子课题名：子课题号：子课题人：：试验项目： 试验人员：试验负责：报告日期：20-04-10 计数月份：20月 研究资格系数 (0.5-1.0) 实验设计系数 （0.9-1.0） 报告得分 总分 实验设计 实验记载 实验分析 实验简报 实验文章 1-20% 21-40% 41-60% 61-80% 81-100% 1%-5% 设计，实施实验，记载，分析清晰，结论清晰文献完整，发表水平 福建省农业科学院生物技术研究所 生物农药研究中心 电话: 0591 传真: 0591 试验目的 肠道菌群是机体常在菌群的重要组成部分,机体的健康和疾病的发生和发展与其多样性及种群的变化有着密切关系。因此,对肠道菌群进行研究具有重要意义是一种分析微生物群落的有效工具,可以用于研究肠道菌群结构多样性和种群结构的变化探索 2．试验方法 材料与振荡器摇床细菌：NA培养基;真菌：PDA培养基;放线菌:高氏培养基; 称样：称取1 g粪便至装有9mL无菌水的三角瓶，摇床振荡15 min， 使之充分溶解，即配成10浓度 稀释土壤原液吸取1 mL原液至装有9 mL无菌水的试管，即配成10浓度，依次稀释配置成10、1010-6； 平板超净台上无菌操作，溶液在振荡器上振荡10-20 s，200 μL至相应标记浓度的平板上，溶液滴至平板中央，用涂布棒涂匀。涂好的平板正放静置一会，使溶液渗透进平板中。每个梯度重复3次10-3、10-4、1010-1、10-2、10-3 ；放线菌梯度：10-2、10-3、10-4； 培养:：将涂好的平板用报纸包好倒置恒温箱中培养结果计算每克粪样中微生物的数量＝同一稀释度的个平板上菌落平均数 × 稀释倍数／含菌样品克数3．试验结果 根据菌落特征观察2个粪样细菌分离的结果见表2和表3。由表中可以看出，粪便和废弃垫料中的细菌种类数相同，但是细菌数量上差距稍大些，在粪样中，1和2为优势菌种，在基质样中，2(照片中的3)为优势菌种，从菌落形态看，应是JK-2。 表2 不同粪样分离细菌数量 粪样 粪样原始编号 备注（肉眼观察） 重 复 细菌含量 （×104cfu/g） 均值（×104cfu/g） 1 5种菌 (10-5) Ⅰ 445 403 Ⅱ 36 Ⅲ 403 2 5种菌 （10-5） Ⅰ 10.5 21 Ⅱ 31.5 Ⅲ 21 表３ 粪样中分离出的细菌菌株菌落特征 菌株 正反面颜色 表面特征 边缘形状 菌落形状 光学特征 1-1 不同，反面深，正面浅 光滑 光滑整齐 圆形，稍凸起，湿润，乳黄色 不透明，有光泽 1-2 不同。正面深，反面浅 不光滑 不光滑整齐 圆形，扁平，稍湿润，乳黄色 不透明，稍有光泽 1-3 不同，反面深，正面浅 较光滑 较光滑整齐 圆形，扁平，偏干，淡黄色，周边环状褶 不透明，稍有光泽 1-4 不同，反面深，正面浅 光滑 光滑整齐 圆形，凸起，偏干，白色 不透明，稍有光泽 1-5 不同，反面深，正面浅 不光滑 光滑整齐 圆状，突起，湿润，淡黄色 不透明，有光泽 2-1 不同，反面深，正面浅 中部不平整 光滑整齐 圆形，凸起，湿润，淡黄色 不透明，有光泽 2-2 不同，反面深，正面浅 不光滑 光滑整齐 圆形，较扁平，有褶状突起，稍湿，粉褐色 不透明，边有光泽 2-3 不同，反面深，正面浅 光滑 光滑整齐 圆形，扁平，稍湿润，黄白色 不透明,有光泽 2-4 不同，反面深，正面浅 不光滑 光滑不整齐 不规则，突起，偏湿润，粉褐色 不透明，有光泽 2-5 不同，反面深，正面浅 光滑 光滑整齐 圆形，凸起，偏湿润，浅白色 不透明，有光泽 以下是分离结果图： 图1 粪样1（反面） 图2 粪样1（正面） 图3 基质2（反面）（1为真菌，从2重排） 图4 基质（正面） 根据菌落特征观察2个粪样真菌分离的结果见表4和表5。 表4 不同粪样分离真菌数量 粪样 粪样原始编号 备注（肉眼观察） 重 复 真菌含量（×103cfu/g） 均值（×103cfu/g） 1 1种菌 Ⅰ 10 15 Ⅱ 20 Ⅲ 15 2 2种菌 Ⅰ 87 97 Ⅱ 26.