- 1、本文档共7页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
实验二 微量凯氏定氮法 一、目的要求: 理解与掌握凯氏定氮法测定氮含量的原理,掌握样本消化、蒸馏、吸收和滴定的正确操作方法。 二、原理: 有机物与浓硫酸共热,有机氮转变为无机氮(氨),氨与硫酸作用生成硫酸氨,后者与强碱作用释放出氨,借蒸汽将氨蒸至酸液中,根据此过量酸液被中和的程度,即可计算出样品的含氮量。用反应式表示如下: 中和程度用滴定法来判断,分回滴法和直接法两种。 (1)回滴法:用过量的标准酸吸收氨,其剩余的酸可用标准NaOH滴定,由盐酸量减去滴定所耗NaOH的量即为被吸收的氨之量。此法采用甲基红做指示剂。 (2)直接法:用硼酸作为氨的吸收溶液,结果使溶液中[H+]降低,混合指示剂(PH4.3-5.4),黑紫色变为绿色。再用标准酸来滴定,使硼酸恢复到原来的氢离子浓度为止,指示剂出来淡紫色为终点,此时所耗的盐酸量即为氨的量。 二、试剂 样液:1g卵清蛋白溶于0.9%NaCl液,并稀释至100ml。如有不溶物,离心取上清液备用。 浓硫酸(A.R.)。 硫酸钾:硫酸铜=3:1(W/W)混匀研成粉末。 30%氢氧化钠溶液:30gNaOH溶于蒸馏水,释至100ml。 2%硼酸溶液:2g硼酸溶于蒸馏水,释至100ml。 混合试剂:0.1%甲基红酒精溶液和0.1%甲烯蓝酒精溶液按4:1比例(V/V)混合。本指示剂在PH5.2时为紫红色,PH4.5时为暗蓝(或灰色)色,PH5.6时为绿色,变色点PI为5.4。 0.01mol/L标准盐酸溶液,用恒沸盐酸准确稀释。 1.消化: 蛋白质 + H2SO4 (NH4)2SO4 + CO2↑+ SO2↑ + H2O 2.蒸馏: (NH4)2SO4 + 2NaOH 2NH3↑+ Na2SO4 + 2H2O 3.吸收: 2NH3 + 4H3BO3 (NH4)2B4O7 + 5H2O 4.滴定: (NH4)2B4O7 + 2HCl + 5H2O 2NH4Cl + 4H3BO3 为了加速消化,可加入CuSO4作催化剂,硫酸钾或硫酸钠可提高溶液的沸点。此外硒汞混合物或钼酸钠可作为催化剂,且可缩短作用时间,H2O2也可加速反应。 三、操作方法 消化 蒸馏 滴定 计算 (A – B)×M×14.008×100 C X% = X: 样品总氮含量(%); A: 样品消耗盐酸标准液的体积(mL); B: 空白实验消耗盐酸标准液的体积(mL); M:盐酸标准溶液浓度(mol/L) C: 相当于样品未稀释前的体积 (mL) 消化 1. 凯氏烧瓶编号加样: 空白管 (1.0ml蒸馏水) : 样品管(1.0ml样品) 2. 加硫酸钾-硫酸铜20mg, 浓硫酸2ml, 沸石 3. 凯氏烧瓶一起放入消化炉, 盖好, 消化至透明淡绿色 4. 注意控制火力, 防止暴沸! 蒸馏 1. 锥形瓶及定氮仪的洗涤 3. 加碱, 加蒸馏水 2. 凯氏烧瓶及锥形瓶的安装 4.注意硼酸颜色的变化 取凯氏烧瓶时小心烫伤! 四、思考题 1.总氮测定时,消化至关重要,样品消化时注意事项有哪些? 2.样品的蛋白质含量为多少? * *
您可能关注的文档
- 安必信顾问培训课程安必顾问培训课程.ppt
- 完形填空综合练习完形填综合练习.ppt
- 完型填空训练及答案 教版师版.doc
- 完善校本教研制度 推动堂教学改革完善校本教研制度 推动课堂教学改革.doc
- 宏观经济学(高鸿业版)12章第12章.ppt
- 宋 斌(北方恒利:铸造工艺设计模拟优化CASTsoft在核屏蔽箱体铸钢件的生产应用宋 斌(北方恒利):铸造工艺设计模拟优化CASTsoft在核屏蔽箱体铸钢件的生产应用.doc
- 定点医院几点意见定点医几点意见.ppt
- 完成句子基本句型结构完.doc
- 安全生产知识培训教案安.ppt
- 宜兴安装施工组织设计方 2案 2.doc
- 2021-2022学年湖南省常德市安乡县四年级上学期期中语文真题及答案.pdf
- 2023-2024学年河南省南阳市社旗县四年级上学期期中数学真题及答案.pdf
- 2022-2023学年云南省曲靖市四年级下学期期末数学真题及答案.pdf
- 2021-2022学年河南省周口市鹿邑县二年级下册月考语文真题及答案.pdf
- 2018年河南焦作解放区教师招聘考试真题及答案.pdf
- 2019年江西公务员行测考试真题及答案-乡镇.pdf
- 2019中国石油报社应届高校毕业生招聘试题及答案解析.pdf
- 光大银行招聘应届毕业生能力素质测试笔试真题及答案.pdf
- 2024年广西百色教师招聘考试模拟题及答案.pdf
- 2021-2022学年浙江绍兴诸暨市五年级上册语文期末试卷及答案.pdf
文档评论(0)