新型快速低成本SPE法检测黄曲霉毒素B1B2G1G2M1..docVIP

新型、快速、低成本检测黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1 目前检测黄曲霉毒素的方法疫亲和层析净化高效液相色谱法和酶联免疫吸附法（ELISA）这两种方法。酶联免疫吸附法（ELISA）操作简单，快速，但会出现假阳性，需使用免疫亲和柱法进行精确定性、定量，而免疫亲和柱使用繁琐价格昂贵针对，迪马科技最新开发出新型、快速、低成本的ProElutTM固相萃取方法。该方法可实现与免疫亲和柱法的高精度回收率结果，但使用成本却大大降低。ProElutTM固相萃取法单个样品的检测成本为免疫亲和柱法的1/4，酶联免疫法的1/2，同时ProElutTM固相萃取法简单易操作、不需要专用的大型设备、对操作人员要求不高，特别适用于各种食品生产企业及检测机构，将大大降低黄曲霉毒素的检测成本。 以下为使用ProElutTM固相萃取柱开发的B1、B2、G1、G2、M1黄曲霉毒素M1的检测方案，供您参考！乳制品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1的检测1 适用范围 适用于牛奶、奶粉等乳制品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1的检测。 2 样品准备/提取 2.1 称取 g样品，加入mL乙腈，涡旋混合1 min； 加入mL乙腈，涡旋混合1 min，4000rpm，离心5 min； 取上清液 mL，作为上样液待净化。 2. 奶粉等固体奶制品 称取 g样品，加入5mL，涡旋混合min，样品与水充分混匀； 加入mL乙腈，涡旋混合1 min 再加入mL乙腈，涡旋混合1 min，4000rpm，离心5 min； 取上清液5 mL，作为上样液待净化。 3 SPE柱净化——ProElut1500 mg/12 mL（Cat.#） (1)活 化： 10 mL乙腈，流出液弃去； (2)上 样： 将上样液加入柱中接收流出液(3)洗 脱： 10 mL乙腈洗脱，收集流出液。合并步骤（2）、（3）流出液； (4)重新溶解： 在40℃下用减压蒸馏将流出液浓缩至2 mL，加入5 mL无水乙醇，继续减压蒸馏 依次加入0.5 mL正己烷和0.5 mL三氟乙酸，旋好玻璃塞充分混匀衍生液，45℃静置10 min。然后挥干衍生液，用10%乙腈水溶液定容至0.5 mL。 4 分析条件 色谱柱： Diamonsil C18（2），250 mm×4.6 mm，5μm（Cat.#99603） 流 速： 1.0 mL/min 检测器： 荧光检测器，Ex:365 nm；Em:435 nm 柱 温： 30℃ 进样量： 20 μL 流动相： 梯度设置 时间/min 0 5 15 20 21 30 A% 90 80 80 60 90 90 B% 10 20 20 40 10 10 5 添加回收结果 牛奶中黄曲霉毒素添加回收结果 分析物 添加水平(μg/kg) 回收率/% RSD(n*=4)/% 黄曲霉毒素B1 1.0 86.09 2.81 黄曲霉毒素B2 1.0 83.94 2.04 黄曲霉毒素G1 1.0 83.28 1.58 黄曲霉毒素G2 1.0 92.15 3.71 黄曲霉毒素M1 1.0 93.82 3.62 奶粉中黄曲霉毒素添加回收结果 分析物 添加水平(μg/kg) 回收率/% RSD(n*=4)/% 黄曲霉毒素B1 2.0 95.24 3.69 黄曲霉毒素B2 2.0 75.77 2.65 黄曲霉毒素G1 2.0 78.65 2.43 黄曲霉毒素G2 2.0 08 1.79 黄曲霉毒素M1 2.0 872 4.21 5.3黄曲霉毒素HPLC图 5.4 牛奶中黄曲霉毒素检测HPLC图 黑色：黄曲霉毒素标准溶液1.0 ng/mL色谱图； 蓝色：牛奶中黄曲霉毒素加标1.0 ug/kg色谱图； 粉色：牛奶未添加黄曲霉毒素色谱图。 5.5 奶粉中黄曲霉毒素检测HPLC图 黑色：黄曲霉毒素标准溶液1.0 ng/mL色谱图； 蓝色：奶粉未添加黄曲霉毒素色谱图。 粉色：奶粉中黄曲霉毒素加标2.0 μg/kg色谱图； 注：ProElutTM SPE法检测黄曲霉毒素M1的详细解决方案请链接/Application/show/id/606 黄曲霉毒素检测相关产品信息： (参考GB 5413.37-2010乳和乳制品中黄曲霉毒素M1的测定，GB/T 5009.23-2006 食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的测定 等标准) 货号 名称 规格 样品前处理 65904 黄曲霉毒素检测专用固相萃取柱 ProElutTM AFT1500mg/12mL, 20/pk 82O-COIAC1005 黄曲霉毒素M1免疫亲和