精化13级-精化产品综合及质量控制(含化妆品微生物)-实训指导书教材.doc

中山火炬职业技术学院 实训教学指导书 系 别： 生物医药系 指导教师： 杨懋勋 职 称： 副教授 学 期： 2015~2016学年 一 学期 精化产品综合分析及质量控制 （含化妆品微生物） 实训指导书 实训一 玻璃器皿的清洗、包扎和干热灭菌 一、实训目的 1、能说出微生物实训所需的各种常用器皿名称和规格。 2、会清洗各种常用的玻璃器皿。 3、能对玻璃器皿进行干热灭菌操作 。 二、实训器材 1、常用各种玻璃器皿。 2、清洗工具和去污粉、肥皂、洗涤液。 3、电热干燥箱。 三、实训原理 为了保证实训顺利进行，要求把实训用器皿清洗干净。保持灭菌后无菌状态，需要对培养皿、吸管等进行妥善包扎。试管和三角瓶要做棉塞。这些工作看来很普通，如操作不当或不按规定要求去做，会导致实训的失败！因此应看作是微生物实训的基本操作。 四、实训步骤 （一）器皿洗涤的注意事项和方法 1、任何洗涤方法，都不应对玻璃器皿有所损伤，所以不能用有腐蚀作用的化学药剂，也不能使用比玻璃硬度大的物品来擦拭玻璃器皿。 2、一般新的玻璃器皿用1~2%的盐酸溶液浸泡数小时（2-6h），用水充洗干净。 3、用过的器皿应立即洗涤，有时放置太久会增加洗涤困难。 4、难洗涤的器皿不要与易洗涤的器皿放在一起。有油的器皿不要与无油的器皿放在一起，否则使本来无油的器皿也沾上了油垢，浪费药剂和时间。 5、强酸、强碱、琼脂等腐蚀、阻塞管道的物质不能直接倒在洗涤槽内，必须倒在废缸内或指定的地方。 6、含有琼脂培养基的器皿，可先用小刀或铁丝将器皿中的琼脂培养基刮去，或把它们用水蒸煮，待琼脂融化后趁热倒出，然后用水洗涤。 7、一般的器皿都可用去污粉、肥皂或配成5%热肥皂水来清洗，油质很重的器皿，应先将油层擦去。 8、如果器皿沾有煤膏、焦油及树脂类的一些物质，可用浓硫酸或40%的氢氧化钠液洗，或用洗涤液浸泡。 9、当器皿上沾有蜡或油漆等物质，用加热方法使之融化揩去，或用有机溶剂（苯、二甲苯、丙酮、松节油等）拭揩。 10、洗涤后的器皿达到玻璃能被水均匀湿润而无条纹和水珠。 11、载玻片或盖玻片可先在2%盐酸溶液中浸1小时，然后在水中冲洗2~3次，最后用蒸馏水洗2~3次，洗后烘干冷却或浸于95%酒精中保存备用。 用过的载玻片或盖玻片，先擦去油垢，再放在5%肥皂水中煮10分钟后，立即用清水冲洗，以后放在洗涤液（稀释）中浸泡2小时，再用清水洗至无色为止，最后用蒸馏水洗数次，干后浸于95%酒精中保存备用。 12、凡遇有传染性材料的器皿，洗涤前应经高压灭菌后清洗。 【一般玻璃器皿洗涤操作要点】： 用试管刷蘸取少量去污粉反复刷洗器皿2-3次。 用自来水冲洗2-3次。 用少量蒸馏水或去离子水荡洗1-2次，控干水分。 （二）器皿干燥 洗干净的玻璃器皿，一般是在室温下自然干燥。若急需使用或需要高温干燥，可使用电热干燥箱干燥，温度一般在105~120℃烘0.5~1h。（使用干燥箱时应注意，要在温度下降到60℃以下再打开箱门，取出器皿使用）。 知识拓展：玻璃称量瓶等在烘干后要放在干燥器中冷却和保存；带实心玻璃盖的及厚壁仪器烘干时要注意慢慢升温并且温度不可过高，以免破裂。量器不可放在烘箱中烘，硬质试管可用酒精灯加热烘干，要从底部烤起，把管口向下，以免水珠倒流把试管炸裂，烘到无水珠后把试管口向上赶净水气。 （三）器皿包扎 为了灭菌后仍保持无菌状态，各种玻璃器皿均需包扎。 1、培养皿：洗净烘干后每7套迭在一起，用牢固的纸卷成一筒，外面用绳子捆扎，以免散开，然后进行灭菌。到使用时在无菌环境中才打开取出培养皿。 2、吸管：洗净烘干后的吸管，在口吸的一端用尖头摄子或针塞入少许脱脂棉花，以防在使用时造成污染。塞入棉花的量要适宜，棉花不宜露在吸管口的外面，多余的棉花可用酒精灯的火焰把它烧掉。 每支吸管用一条宽约4-5厘米，以30-50°左右的角度螺旋形卷起来，吸管的尖端在头部，吸管的另一端用剩余纸条迭打结，不使散开，标上容量。若干支吸管扎成一束，灭菌后，同样要在使用时才从吸管中间拧断纸条抽去吸管（见下图）。 3、试管和锥形瓶：试管和三角瓶都要作合适的棉花塞。棉花塞的作用是起过滤作用，避免空气中的微生物进入试管或三角瓶。 棉塞制作方法如下图所示。棉塞的形状、大小和松紧度要合适，四周紧贴管壁，不留缝隙，才能起到防止杂菌侵入和有利通气的作用。棉塞过紧易挤破管口和不易塞入，过松易掉落和污染。要使棉塞总长约2/3至3/5塞入试管口或瓶口内，以防棉塞脱落。有些微生物需要更好的通气，则可用8层纱布制成通气塞。有时也可用试管帽或塑料塞代替棉塞