檢定用菌种管理规程.docVIP

　标准操作规程 标 题：检定用菌种管理规程 生效日期 年 月 日 页次：1/编号：SOPQC－031－01 颁发部门：质量管理部 新订 修订 原文件号： 编制： 部门审核： QA审核： 批准： 分发部门： QC。 目的：建立一个检定用菌种管理规程。 范围：适用于QC。 责任者：ＱＣ化验室检定菌保管员、QC主任。 规程： 1. 菌种的采购 菌种的采购由检定人员提出并填写请购单，内容应包括菌种名称、编号、购买数量、用途等，经质量管理部负责人批准后，到当地药检所或菌种保存机构购买。 2.菌种的保存 2.1.菌种的保存应由质量检验机构指定的负责人负责，此人应受过专业培训，并有菌种保存的经验。 2.2. 菌种保存负责人应该填写菌种保管记录。内容：菌种名称、编号、来源、购买日期、形态特征、培养特征、菌种传代次数、传代时间间隔、传代者签名、最佳培养基、培养条件、保存方法、贮存条件、保存地点等，在保存容器外加贴标签，内容为名称、编号、购买日期。2.4. 菌种应该保存于冰箱中，保存温度为46℃。 2.. 每周检查一次保存菌种的冰箱温度、湿度、菌种管的棉塞是否松动、生霉。如有异常及时处理，并逐次记录。 3. 菌种的传代 3.1. 菌种必须进行传代，传代和接种在菌种接种室内进行。 标 题 检定用菌种管理规程 颁发部门 质量管理部 编号 SOPQC－031－01 页次：2/3.2. 传代操作3.2.1. 先点燃酒精灯，在火焰旁的上部空间操作。烧灼接种环。 3.2.2. 将原有的菌种斜面培养基（简称菌种管）与待种的新鲜外面培养基（简称接种管），持在左手拇指、食指及中指之间，要注意能清楚地观察到斜面，菌种管在前，接种管在后。应斜持试管呈45°角，使试管内斜面向上，两试管口平齐，注意不要持成水平，以免管底凝集水浸湿培养基表面。 3.2.3. 以左手在火焰旁转动两管的棉塞，以便接种时易于拔取。再以右手持接种环的柄端，垂直或稍斜地把接种环在火焰上烧灼。顶端的环必须烧红，以彻底灭菌。环以上凡接种时可进入试管的部分，也应通过火焰烧灼。烧灼时，应把环置于酒精灯的外焰上，因外焰的温度比内焰高，容易烧红。 3.2.4. 使用右手的小指和手掌之间以及无名指与小指之间，在火焰旁分别拔出两支试管的棉塞，持住。再将试管口在火焰上通过，以杀灭管口可能沾污的细菌，但勿烧烫。 3.2.5. 先将烧灼过的接种环插入菌种管内，接触无菌苔生长的培养基上，如有熔印则表明接种环未冷却，能烫死细菌。一定待冷后，再从斜面上挑取菌苔少许。取出时接种环不能通过火焰，应在火焰旁迅速插入接种管，在斜面上轻轻划线接种。划线时一般先由下而上划一直线后，再由上而下划曲线。操作过程应迅速，勿使菌苔沾至管壁或管口。 3.2.6. 当接种完毕，立即将管口通过火焰灭菌，右手到火焰旁塞上棉塞，不要将管口离开火焰旁去迎接右手的棉塞。最后将接种环烧灼灭菌放置原处，再把棉塞塞紧，即可进行培养。 3.3.7. 操作过程中，如因不慎使棉塞触及火焰而着火，切勿用口吹，须在刚刚着火时迅速塞入试管，因管内氧气不足会很快熄灭。若棉塞外端着火，可用手捏熄。若棉塞烧坏不宜再用，可另取末接种斜面培养基上的灭菌棉塞，代替塞上。 3.3.8. 接种并培养后的菌种放冰箱保存。传代和接种使用后，应记好记录。 4. 检定菌定期检查 4.1. 保存期菌种的新陈代谢处于最低水平，易发生变异和死亡，因此必须对保藏期菌种定期检查。 标 题 检定用菌种管理规程 颁发部门 质量管理部 编号 SOPQC－031－01 页次：/3 4.2. 定期检查菌种外观及干燥状态。 4.3. 定期将菌种培养复活，检查保藏菌种的存活率和形态并记录。 4.4. 控制传代次数。传代次数越多，突变机率越大，因此要尽量少传代，大肠杆菌每隔６个月传代一次，如发现菌种变异，应销毁灭活（加热失活），有灭活记录。 4. 检定菌的发放 4.1. 检定菌由专人负责发放，并有发放记录。 4.2. 所有发出的检定菌应是培养后健康、生命力强、无变异的菌。 菌种保存记录检定菌发放记录附件：菌种保存记录 菌 种 保 存 记 录 编号：RQC－040－01 菌种名称 编号 来源 购进日期 形态特征 最佳培养基 储存地点 保存方法 贮存温度 保存地点 传代记录 传代日期 传代时间间隔 传代次数 传代支数 传代者签名 发放者签名