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污水微生物指標检查法
污水总大肠菌群的检验方法
一、采样方法 用采水器或其他灭菌容器采取污水样1000毫升，放入灭菌瓶内，如果是经加氯处理的污水，需加1.5%硫代硫酸钠5毫升中和余氯。
二、检验方法 总大肠菌群系指一群需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌在37℃恒温箱内，培养24小时，能使乳糖发酵产酸产气。总大肠菌群数系指每升污水中，所含的总大肠菌群的数目。 （一）初发酵试验：以无菌操作将各盛有3倍浓缩乳糖蛋白胨培养液5毫升的5支发酵管内，各接种污水样10毫升，将各盛有单料乳糖蛋白胨培养液约10毫升5支的发酵管内，各接种污水样1毫升，再将各盛有单料乳糖蛋白脏培养液约10毫升的5支发酵管内，各接种1∶10稀释的污水样1毫升（相当于原污水样0.1毫升）。将此15支管已接种的发酵管置于37℃恒温箱内，培养24小时。 （二）平板分离：经培养24小时后，将产酸产气及只产酸不产气的发酵管，分别接种于伊红美兰培养基或品红亚硫酸钠培养基上，置37℃恒温箱培养18～24小时，挑选符合下列特征的菌落，取菌落的一小部分，进行涂片、革兰氏染色、镜检。 1 伊红美兰培养基上的菌落色泽： （1）深紫黑色，具有金属光泽的菌落； （2）紫黑色，不带或略带金属光泽的菌落； （3）淡紫红色、中心色较深的菌落。 2 品红亚硫酸钠培养基上的菌落色泽： （1）紫红色，具有金属光泽的菌落； （2）深红色，不带或略带金属光泽的菌落； （3）淡红色，中心色较深的菌落。 （三）复发酵试验：涂片、镜检的菌落，如为革兰氏阴性无芽孢杆菌，则挑取上述典型菌落1～3个接种于一支单料乳糖发酵管内，然后置于37℃恒温箱内，培养24小时，产酸产气者（包括小量产气）即证实有大肠菌群存在。 根据证实有大肠菌群存在的阳性管数，查对总大肠菌群近似数（MpN）检索表（附表1.1）即是每升污水中的大肠菌群数。此MPN表中所列数值系指100毫升水样中的细菌数，因此需将表中的数值再乘10、为每1000毫升水中的细菌数。举例：某一污水样接种10毫升的5支管中有5管为阳性；接种1毫升的5支管中有2管为阳性；接种1∶10稀释水样1毫升（即原污水样0.1毫升）的5支管皆为阴性，即结果为5、2、0，查附表1.1得知100毫升污水中总大肠菌群数为49个，即1000毫升污水中总大肠菌群数为49×10＝490个。 总大肠菌群近似数（MPN）检索表附表
接种量(毫升) 每100毫升水 样中总大肠菌 群近似数 接种量(毫升) 每100毫升水 样中总大肠 菌群近似数 10 1 0.1 10 1 0.1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 2 3 4 5 0 2 4 5 7 9 0 0 0 0 0 0 4 4 4 4 4 4 0 1 2 3 4 5 8 9 11 13 15 17 0 0 0 0 0 0 1 1 1 1 1 1 0 1 2 3 4 5 2 4 6 7 9 11 0 0 0 0 0 0 5 5 5 5 5 5 0 1 2 3 4 5 9 11 13 15 17 19 0 0 0 0 0 0 2 2 2 2 2 2 0 1 2 3 4 5 4 6 7 9 11 13 1 1 1 1 1 1 0 0 0 0 0 0 0 1 2 3 4 5 2 4 6 8 10 12 0 0 0 0 0 0 3 3 3 3 3 3 0 1 2 3 4 5 6 7 9 11 13 15 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 0 1 2 3 4 5 4 6 8 10 12 14 （总接种量55.5毫升，其中5份10毫升水样；5份1毫升水样；5份0.1毫升水样）
续表1
接种量(毫升) 每100毫升水样中总大肠菌群近似数 接种量(毫升) 每100毫升水样中总大肠菌群近似数 10 1 0.1 10 1 0.1 1 1 1 1 1 1 2 2 2 2 2 2 0 1 2 3 4 5 6 8 10 12 15 17 2 2 2 2 2 2 0 0 0 0 0 0 0 1 2 3 4 5 5 7 9 12 14 16 1 1 1 1 1 1 3 3 3 3 3 3 0 1 2 3 4 5 8 10 12 15 17 19 2 2 2 2 2 2 1 1 1 1 1 1 0 1 2 3 4 5 7 9 12 14 17 19 1 1 1 1 1 1 4 4 4 4 4 4 0 1 2 3 4 5 11 13 15 17 19 22 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 0 1 2 3 4 5 9 12 14 17 1
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