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实验四果蝇一对相对性状及伴性遗传规律的验证 一、实验目的 1、验证和加深对分离定律和伴性遗传规律的理解; 2、通过实验掌握果蝇的杂交技术和统计处理方法。 二、实验原理 长翅和残翅是果蝇一对相对性状,它们分别受第二对染色体上的显性基因Vg和隐性基因vg控制,残翅的双翅几乎没有,只有翅膀的残痕,无飞翔能力,长翅对残翅完全显性,长翅果蝇(VgVg)与残翅果蝇(vgvg)杂交,F1代都是杂合体长翅(Vgvg),F1代形成配子时,由于等位基因的分离,雌雄果蝇都形成1:1的Vg和vg配子类型,F2代有3种基因类型:VgVg:Vgvg:vgvg= ,表现型比例为:长翅:残翅= 。 果蝇的红眼和白眼是一对相对性状,控制果蝇红眼和白眼的基因(W,w)位于果蝇的X染色体上,红眼对白眼完全显性。当红眼雌果蝇与白眼雄果蝇杂交,F1代雌雄果蝇均为红眼,F2代中红眼果蝇:白眼果蝇=3:1,但雌果蝇全为红眼,雄果蝇中红眼:白眼=1:1。当反交时,F1代中雌果蝇为红眼,雄果蝇为白眼,F2代中红眼果蝇:白眼果蝇=1:1,且在雌果蝇或雄果蝇中红眼果蝇与白眼果蝇比例均为1:1。 三、仪器与材料 材料:野生型果蝇,残翅果蝇,白眼果蝇 器具:培养基,酒精棉球,放大镜,培养瓶,麻醉瓶,白瓷砖,毛笔,记录本 四、实验程序 1、选处女蝇:将培养瓶中的成虫果蝇全部转移出来,12小时内羽化出来的都是处女蝇,处女蝇单独收集备用,一般前一天晚上8点以后放掉所有成虫果蝇,从第二天早上8点收集的果蝇中挑出雌蝇即为处女蝇。 2、接种:选处女蝇和雄果蝇5~10对放入培养瓶中,贴标签记录杂交类型、时间、实验人 3、培养杂交:将杂交培养瓶放入25℃恒温光照培养箱培养,第二天检查亲本蝇的成活情况,如有死亡,应及时补充,如果培养基发霉,应及时消毒。 4、去除亲本蝇:培养7~8天后,将亲本蝇放飞或转移出来。 5、观察F1:培养11~12天后,F1代果蝇羽化出来,观察F1代的果蝇,并作纪录。 6、F1自交:麻醉F1代成蝇,选取5~10对雌雄果蝇移入新的培养瓶中,自群繁殖。 7、去除F1代:接种F1代果蝇7~8天后,移去F1代果蝇。 8、观察统计F2代:培养11~12天后,F2代果蝇出现,观察并记录F2代果蝇不同类型数目,每隔一天观察统计一次,连续3~4次,约需要统计100~200只。 9、计算实验结果,进行卡平方检测,检测所得到得实验结果是否符合分离定律或伴性遗传规律。 [重要实验步骤]: 本实验属于设计型实验,有两个以上题目可以选择,即果蝇一对相对性状遗传规律(或果蝇单因子遗传规律)、果蝇伴性遗传规律的验证。建议在选处女蝇时将培养瓶中的成虫果蝇全部转移出来,12小时内羽化出来的都是处女蝇,处女蝇单独收集备用,一般前一天晚上8点以后放掉所有成虫果蝇,从第二天早上8点收集的果蝇中挑出雌蝇即为处女蝇。F2代约需要统计100~200只。计算实验结果,进行卡平方检测,检测所得到得实验结果是否符合分离定律或伴性遗传规律。 [实验注意事项] : 1、做杂交时必须选取处女蝇 2、控制适宜的培养温度,定时观察记录 3、果蝇麻醉不宜过度,应轻度麻醉。 4、F2代约需要统计100~200只,并进行卡平方检测。 五、实验结果 统计各种类型果蝇的数目并填写有关表格,计算实验结果,进行卡方验证,检验所得实验结果是否符合分离定律或伴性遗传规律。 [作业] : 所得实验结果是否符合分离定律或伴性遗传规律?为什么? * 1:2:1 3:1 X2=(o-c)2/c 偏差(o-c) 理论预期值(c) 实际观察值(o) F2 F1 残翅 长翅 残翅 长翅 备注 反 交 残翅♀ ╳ 长翅♂ 正 交 长翅♀ ╳ 残翅♂ F1各类型 观察日期 X2=(o-c)2/c 比例 总数 红眼♂ 红眼♀ 白眼♂ 红眼♀ 备注 反 交 红眼♀ ╳ 白眼♂ 正 交 白眼♀ ╳ 红眼♂ F1各类型 观察日期 X2=(o-c)2/c 比例 总数 红眼♂ 红眼♂ 红眼♀ 红眼♀ 白眼♂ 红眼♂ 白眼♀ 红眼♀ 备注 反 交 红眼♀ ╳ 白眼♂ 正 交 白眼♀ ╳ 红眼♂ F2各类型 观察日期 *
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