球形紅细菌生物转化槲寄生中总三萜类化合物的测定.docVIP

球形红细菌生物转化槲寄生中总三萜类化合物的测定 [摘要]目的：建立槲寄生及球形红细菌转化槲寄生培养液中总三萜类化合物的含量测定方法，并对各个样品的含量进行比较研究。 方法：采用紫外分光光度法，以齐墩果酸为对照品，5%的香草醛-冰醋酸溶液和高氯酸为显色系统，535 nm波长处测定总三萜类化合物的含量。 结果：齐墩果酸在 2～12 μg/ml 的范围内线性关系良好，标准曲线回归方程为A=21.988C-0.072，r=0.989 5。 75%的乙醇提取、半量常规培养基、游离球形红细菌培养，所得培养液（样品 3）总三萜含量和槲寄生75%的乙醇提取液（样品 1）相比增加 141%。 结论：经过球形红细菌转化可以增加槲寄生提取液中总三萜类化合物的含量。 [关键词]槲寄生；光合细菌；球形红细菌；三萜类化合物；含量测定Determination of the total triterpenes in mistletoe transformed by rhodobac- ter sphaeroides [Abstract] Objective: To establish methods for the determination of total triterpenes in mistletoe and its transformation products by rhodobacter sphaeroides, and to compare the contents of each sample. Methods: Oleanolic acid was taken as the standard, the content of total triterpenes was measured by spectrophotometry with 5% vanillin-glacial acetic acid solu - tion and perchloric acid as color-developing agent and the detection wavelength was at 535 nm. Results: The linear corre- lation of oleanolic acid calibration curve was good in the range of 2-12 μg/ml, and the calibration curve regression equa- tion was A=21.988C-0.072, r=0.989 5. Compared with 75% ethanol extract of mistletoe (sample 1), the content of total triterpenes in 75% ethanol mistletoe extract cultured with half amount of conventional medium and rhodobacter sphaeroides (sample 3) increased by 141%. Conclusion: The content of total triterpenes in mistletoe extract can be enhanced after bio- transformed by rhodobacter sphaeroides. [Key words] Mistletoe; Photosynthetic bacteria; Rhodobacter sphaeroides; Triterpenes; Content determination 槲寄生为桑寄生科槲寄生属植物 V. coloratum （Komar.） Nakai 的干燥带叶茎枝，具有祛风湿、补肝肾、强筋骨、安胎 作用 [1] 。 其中含有黄酮类、生物碱类、三萜类、多肽等化合物。 球形红细菌为光合细菌中的一种，为一种有益菌，可以转化 中药中的部分成分 [2-3] 。 本课题组通过一定工艺制得球形红 细菌转化槲寄生培养液（PSBT），提高了槲寄生的抗肿瘤活 性，降低了其毒性。 通过系统分离、细胞毒活性筛选表明，三 萜类化合物为其中细胞毒活性的有效部位之一 [4] 。 本文建立 槲寄生及球形红细菌转化槲寄生培养液中总三萜类化合物 的含量测定方法，并对槲寄生及 PSBT 中各含量进行比较研 究 ， 为球形红细菌转化槲寄生化学成分和转化机制研究奠 定基础 。 1 仪器与试剂 1.1 药材 由亳州市中药饮片厂加工，东北产地，并经山西医科大 学药学院中药学教研室高建平教授鉴定为桑寄生科槲寄生 属植物槲寄生 [V. col