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四川农业大学《现代植物生理学》实验报告
烯效唑(s3307)浸种对
小麦幼苗生长的影响
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烯效唑(s3307)对小麦幼苗生长的影响
摘要:本实验以川育20为材料,经过烯效唑(s3307)处理测定其形态指标和某些生理指标,通过采用TTC法、分光光度法、TBA法、酸性茚三酮比色法。测得以下结果:随着烯效唑浓度的增加,苗高和根数逐渐减小,根长、叶片数、面积和根冠比逐渐增大,表现为抑上促下;在烯效唑浓度为10(mg/l)时,幼苗的根系活力将达到峰值;当烯效唑浓度为10-20(mg/l)时,脯氨酸和丙二醛的含量都达到较高;烯效唑对叶绿素含量影响较为复杂,总的来说在在烯效唑浓度0-20(mg/l)时有较大值。综上所诉,以10mg/l浓度的烯效唑溶液对川育20小麦种子浸种对其生长较为有利,建议应用到田间推广。
关键词:烯效唑(s3307)、小麦、浸种、形态指标、生理指标
前言:
烯效唑是20世纪8O年代日本住友化学公司推出的一种高效植物生长延缓剂和广谱杀菌剂,兼有杀菌和除草作用。它可以由植物的种子、叶片和根吸收,影响到植物体内贝壳杉烯氧化酶活性,抑制赤霉素合成。与同为三唑类的多效唑相比,烯效唑的生物活性更高,对环境更安全【1】。其作用机理是切断贝壳杉烯到贝壳杉烯酸的氧化,从而抑制GA合成。并认为这是抑制植物细胞伸长的主要原因。烯效哇对叶片长度的抑制效应随叶龄增大而逐渐降低,浓度越大.作用时间愈长,抑制效应可延续到9叶。由于烯效唑对G 合成的抑制导致植株纵向生长受阻而横向生长加强,株型表现为矮小紧凑,茎杆粗壮。烯效唑对禾谷类作物等具有控上促下的效果,提高小麦种子活力,但同时使得叶片伸长生长受抑,叶色浓绿,幼苗矮健【2】。对烯效唑(S-3307)浸种对小麦幼苗生长的影响的研究,有利于生产上更好的提高小麦产量和质量,为实际生产提供理论依据。
材料与方法
1.1材料设备与试剂
材料:川育20,由川农大实验室提供
设备:分光光度计、天平、水浴锅、离心机、移液管、容量瓶、试管、研钵、恒温箱等
试剂:琼脂,0.5%TTC,1/15mol/L磷酸缓冲液1mol/L硫酸,80%丙酮,CaCO3,石英砂,80%乙醇,冰醋酸,标准脯氨酸溶液(100ug/L),10%TCA,0.5%TBA,人造沸石,石英砂,酸性茚三酮。
1.2实验方法
1.2.1种子处理前处理
1.2.1.1选种:选择种胚完好籽粒饱满的川育20小麦籽粒。
1.2.1.2表面消毒:用0.1%的升汞消毒10分钟后清洗干净,防止表面微生物的生长。
1.2.1.3浸种:取4个洁净烧杯,分别向烧杯中加入适量0mg/L、10mg/L、20mg/L、40mg/L的烯效唑溶液,每杯中放入60粒选好的小麦种子,浸泡24小时。
1.2.1.4催芽:在25摄氏度的恒温箱中催芽3-5天。
1.2.2幼苗栽植及培养
1.2.2.1制作培养基:按1L自来水和5g琼脂的比例倒入锅中煮沸后,用10%的氢氧化钠调节PH至6.0。用干净的种植杯以每杯分装200毫升混合液,等待冷却。
1.2.2.2栽植及培养:将每种烯效唑浓度的小麦幼苗栽植到两个种植杯中,每杯中栽植30棵,注意保护好小麦根。栽植好后做好标记放到培养室培养2周,生长过程中应加供植物生长所需的水。
1.2.3测定项目及方法
1.2.3.1根系活力测定:TTC法【3】
1.2.3.1.1标准曲线的制作
取1mlTTC加入50ml容量瓶中,再加入少许保险粉和40ml乙酸乙酯,剧烈震荡容量瓶,使TTC充分还原为红色的TPF并溶于乙酸乙酯,用乙酸乙酯定容得到标准溶液20ug/ml的TPF。将该TPF溶液稀释成系列浓度,取10mL容量瓶8个,编号,依次向各试管中加入TPF溶液0、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00、12.00、14.00ug/ml,加入乙酸乙酯定容至10ml。以空白作参比,在分光光度计上,测定485nm下的吸光度,绘制标准曲线。
1.2.3.1.2根系活力的测定
取根尖(1.5cm左右)40条,放入小玻瓶(内含2mlTTC和2ml磷酸缓冲液)中,37℃保温1h,取出根尖置于滤纸上吸干,放入无水研钵中,加入5ml乙酸乙酯研磨提取红色的TTF,用吸管吸取红色溶液于试管中定容到10ml。用乙酸乙酯作空白参比液,在分光光度计上测定485nm下的吸光度。
1.2.3.2形态指标的测定(取每浓度梯度的烯效唑浸种的小麦10株测定)
根长:胚至最长根尖处
根数:胚部发出的根数
苗高:胚至最长根尖处
叶片数
根冠比:105摄氏度杀青10-15min,80摄氏度烘干至恒重后
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