環境工程微生物学复习资料.docVIP

绪论 微生物是肉眼看不见的、必须在电子显微镜或光学显微镜下才能看见的所有微小生物的统称。非细胞结构微生物（病毒、类病毒、拟病毒、朊病毒），生物细胞结构（真和微生物、原核微生物）。 真核（藻类除蓝藻、真菌、原生动物、微型后生生物），原核（细菌、古菌、蓝细菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次氏体）。特点：个体小，比表面积大；数量多；繁殖快，代谢速率快；易变异；种类多，分布广，类型多样。 原生动物：鞭毛纲，眼虫、粗袋鞭虫；肉足纲，太阳虫、变形虫；纤毛纲，草履虫、钟虫、吸管虫。微型后生动物：轮虫、线虫、寡毛类动物、浮游甲克动物。藻类;红褐蓝绿黄金轮隐裸甲硅 第一章非细胞结构的超级微生物-------病毒 1、病毒定义：病毒是一类超显微的非细胞生物，每一种病毒只含有一种核酸；它们只能在活细胞内营专性寄生，靠其宿主代谢系统的协助来复制核酸、合成蛋白质等组分，然后再进行装配而得以增殖；在离体条件下，它们能以无生命的化学大分子状态长期存在并保持其侵染活性。 2、病毒的特点：1.形体极其微小，必须在电子显微镜下才能观察，一般都可通过细菌滤器；2.没有细胞构造，故也称分子生物；3.其主要成分仅有核酸和蛋白质两种；4.每一种病毒只有一种核酸，不是DNA就是RNA；5.既无产能酶系也无蛋白质合成系统；6.在宿主细胞的协助下，通过核酸的复制和核酸蛋白装配的形式进行增殖，不存在个体的生长和二分裂法等细胞繁殖方式；7.在宿主的活细胞内营专性寄生；8.在离体条件下，能以无生命的化学大分子状态存在，并可形成结晶；9.经提纯的病毒结晶能保持侵染力。10.对一般抗生素不敏感，但对干扰素敏感。 3、病毒蛋白质的功能：保护病毒使其免受环境因素的影响；决定病毒感染的特异性；使病毒与敏感细胞表面特定部位有特异亲和力，病毒可牢固的附着在敏感细胞上；病毒蛋白质还有致病性、毒力和抗原性。 4、病毒的繁殖：①吸附是噬菌体与细菌表面受体发生特异性结合的过程，其特异性取决于噬菌体蛋白与宿主菌表面受体分子结构的互补性。②侵入：噬菌体吸附在细菌细胞壁的受体上以后，核酸注入细菌细胞中，蛋白质壳体留在外面。从吸附到侵入，时间间隔很短，只有几秒到几分钟。③核酸复制：噬菌体核酸进入寄主细胞后，操纵寄主细胞的代谢机能，大量复制噬菌体核酸，但不形成带壳体的粒子，称为潜育期。④聚集和释放：寄主细胞合成噬菌体壳体形成完整的噬菌体粒子。 毒性噬菌体(virulent phage)：能在宿主细胞内复制增殖，产生许多子代噬菌体，并最终裂解细菌。 温和噬菌体(temperate phage)：噬菌体基因与宿主染色体整合，不产生子代噬菌体，但噬菌体DNA能随细菌DNA复制，并随细菌的分裂而传代。 整合在细菌基因组中的噬菌体基因组称为前噬菌体(prophage)，带有前噬菌体基因组的细菌称为溶原性细菌(lysogenic bacterium). 温和噬菌体这种产生成熟噬菌体颗粒和溶解宿主菌的潜在能力，称为溶原性(lysogeny)。 某些前噬菌体可导致细菌基因型和性状发生改变，这称为溶原性转换(lysogenic conversion)。 将少量噬菌体与大量宿主细胞混合后，将此混合液与45℃左右的琼脂培养基在培养皿中充分混匀，铺平后培养。经数小时至10余小时后，在平板表面布满宿主细胞的菌苔上，可以用肉眼看到一个个透亮不长菌的小圆斑，这就是噬菌斑plaque 若将噬菌体按一定倍数稀释，通过噬斑计数，可测定一噬菌斑形成单位(plaque forming units,pfu) 敏感细胞要求具备以下条件：⑴必须是活的敏感宿主或是活的敏感宿主组织细胞；⑵能够提供病毒附着的受体；⑶敏感细胞内没有破坏特异性病毒的限制性核酸内切酶，病毒进入细胞就可生长繁殖。 5、病毒对物理化学因素的抵抗力：1.温度 高温使病毒的核酸和蛋白质衣壳受损伤，低温不会灭活病毒，通常在-75 ℃保存病毒。2.光和其它辐射 紫外辐射：有灭活病毒的作用。可见光：大多数肠道病毒对可见光很敏感而被杀死，称为“光灭活作用”。离子辐射：X射线、r射线也有灭活作用。3.干燥 干燥也是控制环境中病毒的重要因素。在土壤中，水分含量低于10％时，病毒会迅速灭活。4、化学因素 体内灭活：抗体、干扰素 体外灭活：破坏蛋白质的化学物质：酚、低离子强度环境 破坏核酸的化学物质：甲醛、亚硝酸、氨 影响脂类的化学物质：醚、SDS、氯仿、去氧胆酸 6、病毒的应用：用于细菌鉴定和分型；分子生物学领域的重要实验工具和理想的材料；用于预防和治疗传染性疾病；用于筛选抗癌物质和检测致癌物；测定辐射剂量；检测人、动物和植物病原菌 第二章 原核微生物 细菌：单细胞不分枝的原核微生物。自然界中杆菌最常见，球菌次之，而螺旋菌最少。 革兰氏染色法：1.涂片固定2.初染—结晶紫染液第一次染色4