江苏省高中生物《1.1 基因工程概述》复习学案 苏教版选修3.docVIP

江苏省灌南高级中学高中生物《1.1 基因工程概述》复习学案 苏教版选修3 学习目标：1、说出基因工程的概念 2、简述基因工程的诞生历程 3、说出DNA重组技术所需的三种基因工具的作用 4、简述基因工程基本操作程序的步骤 学习重点：1、说出DNA重组技术所需的三种基因工具的作用 2、简述基因工程基本操作程序的步骤 学习难点：简述基因工程基本操作程序的步骤 知识梳理： 一、基因工程的诞生和发展： 基因工程的诞生和发展经历了三个时期：1973—1976年为 ，1977—1981年为 ，1982年以后为 。 1973年，美国科学家 等将两种不同来源的DNA分子进行体外重组，并首次实现了在大肠杆菌中的表达，创立了 的新技术———基因工程。 二、基因工程的概念：是指在 通过 等方法，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入 并使重组基因在受体细胞中表达，产生人类所需的 的技术。因此，基因工程又称为 。 ⑴操作环境： ； ⑵操作对象： ； ⑶操作水平： ； ⑷基本过程：剪切→拼接→导入→表达；⑸结果：人类需要的基因产物。 三、基因工程的工具及作用 ㈠限制性核酸内切酶（简称限制酶）——“ ” 1、来源：主要是从 生物中分离纯化出来的。 2、作用：能够识别双链DNA分子的 ，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 断开。 3、特点:具有专一性，表现在两个方面： ① ② 4、结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式： 末端和 末端。 ㈡DNA连接酶——“ ” 1、分类：根据酶的来源不同，可分为E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶两类 2、作用：恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的 。 3、两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶)的比较： ⑴相同点：都缝合 ⑵区别：E．coIiDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能使 之间连接；T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，能缝合两种末端，但连接平末端之间的效率较低。 ㈢载体——“ ” 1、载体的作用： 。 2、载体必须具备三个条件：⑴ ⑵ ⑶ 3、载体的种类：质粒 、 和 等。 最早应用最常应用的载体是质粒，它是细菌细胞中的一种很小的 。 四、基因工程的基本过程 ㈠获得目的基因（目的基因的获取） 1、获取方法主要有三种：⑴从自然界中已有的物种中分离出来，如可从 中获取。⑵用 合成。⑶利用 扩增目的基因。 （1）PCR的含义：是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。 （2）目的： （3）原理： （4）过程：第一步：加热至90～95℃ DNA解链为单链； 第二步：冷却到55～60℃，引物与两条单链DNA结合； 第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始进行互补链的合成。 （5）特点：指数形式扩增 ㈡制备重组DNA分子（基因表达载体的构建） 1、重组DNA分子的组成： 、 、 、 、 。 2、方法：用 分别切割载体和目的