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* 第八章 超临界流体色谱及其它 8.2.1 激光色谱的基本原理 8.2.2 激光色谱的特点 8.2.3 激光色谱的应用前景与发展 第二节 激光色谱 Supercritical fluid chromatograph and others Laser chromatograph * 概述 激光色谱(optical chromatography)是板今太郎于1995年首次提出的利用激光作为推动力的一类新型的色谱分离技术。 分析化学领域的又一个前沿课题。 为人们提供了一个用于研究微米区域内(甚至更小)粒子的物理、化学及生物特性的全新方法。 对化学、分子生物学和生物医学工程等领域产生影响。 * 8.2.1 激光色谱的基本原理 1.光捕集 Optical Trap Technique ;Ashkin 1970年 通过光学系统将一束特定波长的激光聚焦于溶液中,由于溶液中粒子的折光指数大于溶剂的折光指数,所以粒子在激光的辐射压力作用下被聚焦,相当于粒子被捕集一样(在物理上将这种现象称为激光致冷)。 为光色谱的诞生奠定了基础 将待分离组分(或粒子)按几何尺寸的大小分离的技术。 * 2. 激光分离原理 粒子受流动相的推动力f推和激光束的辐射压力f辐共同作用。 粒子受辐射压力的作用聚焦在激光束的中心线上。 f辐f推 时,粒子运动方向发生反转并获得一定的加速度,并受流动相的阻力而逐渐减速,当f辐=f推 时,离子在该处停留。 大粒子受到的辐射压力大,离激光光源位置远,从而实现分离。 * 8.2.2 激光色谱的特点 1.进样简单 2.优化分离条件容易 改变激光束的聚焦条件可以控制粒子的分离效果。光色谱可以控制测定时间。 3.不需要用标准物质对照定性 知道分析物粒子的尺寸大小和折光指数,就可以通过计算来确定粒子的位置而定性。 4.可以随时检测 检测效率100%。 * 5.可同时实现分离和富集 改变激光器的输出功率就可以将粒子按几何尺寸大小收集。 6.可以更有效地分离单个“粒子”或“大分子” 如生物细胞和生物大分子。 7.只要中断激光束就可以恢复样品的初始浓度 8.可以进行“原位”反应或性质研究 粒子位置确定,并可根据需要确定停留时间,可方便地对离子进行化学反应或其他研究。 9.色谱柱的尺寸可以减小至微米级 为微米区域内的化学或分子生物研究提供了场所。 * 8.2.3 激光色谱的应用前景与发展 对聚合物微球、生物细胞、生物大分子(如蛋白质、肽、DNA、RNA的细粒体)进行分离研究。 从理论上讲,可以检测到一个蛋白质分子,这是其他分析方法所不具备的突出特点。 发展方向: 1.完善光色谱理论:分离数学模型,影响分离因素。 2.研制高灵敏度的检测器:提高检测技术。 3.研制性能优良、自动化程度高的光色谱仪器。 4.进行深入的应用研究:生物大分子的微区研究。揭示生物大分子的反应机理等。 * 内容选择 结束 8.1 超临界流体色谱 8.2 激光色谱 8.3 场流分离 * * -刘宇-
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