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医学细胞分子生物学复习提纲 真核生物基因表达调控的环节和重点环节 转录、转录后的调控、翻译 原癌基因激活的主要机制 点突变、基因扩增、染色体易位、 细胞有那些基本的生命活动 生长、分裂、分化、凋亡 细胞骨架的组成 微丝、微管、中等纤维、结核蛋白组成 研究细胞周期的主要手段有那些 光镜、电镜、共聚焦、流式细胞仪 基因、看家基因、奢侈基因的概念 基因 DNA分子中含有特定遗传信息的核苷酸序列，是遗传物质的最小功能单位。合成有功能的蛋白质多肽链或RNA所必需的全部核酸序列（通常是DNA序列）。 看家基因 (housekeeping gene)：基因表达产物是所有组织细胞或生物体整个生命过程中都必须的，是维持细胞生存所必须的基因。 奢侈基因: 基因表达产物是特殊类型的细胞发挥特异功能所必需，这类基因的表达是细胞分化的基础。 HIV是如何特异性地感染宿主细胞的？简述HIV感染的生活史（李老师） HIV感染宿主细胞的方式是：HIV仅感染表面有CD4受体的细胞 HIV的 gp120同靶细胞表面CD4受体结合 靶细胞表面的辅助受体CCR5或CXCR4和gp120和CD4共同形成复合体，病毒颗粒与细胞膜连接。 gp120空间结构改变而显露出的gp41 N末端疏水性融合结构域插入细胞膜，遂构成病毒的侵入。 HIV感染的生活史 吸附→ 穿入→ 脱壳→ 复制与合成→ 装配与释放 说出几个抑癌基因名称 p53、Rb、MTS1、 蛋白激酶种类及功能（李老师） 定义：催化磷酸基团从磷酸供体转移致受体蛋白的酶（使靶蛋白磷酸化的酶）。 酪氨酸蛋白激酶 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶 例： 酪氨酸蛋白激酶(protein-tyrosine kinase, TPK): 使靶蛋白的酪氨酸发生磷酸化的酶 基因工程的主要过程 （一）目的基因的获取:供体生物基因或称外源基因的提取 （二）克隆载体的选择和构建：选择适当的载体 （三）外源基因与载体的连接：连接到另一DNA分子上（克隆载体） （四）重组DNA导入受体菌:　将这个重组DNA分子转入受体细胞 （五）重组体的筛选和鉴定:　对含重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定 （六）克隆基因的表达：进行培养，检测外援基因是否表达 核酸杂交及蛋白杂交的主要类型及其检测对象 （一）DNA印迹技术 (Southern blotting) 用于基因组DNA、重组质粒和噬菌体的分析。DNA-DNA （二）RNA印迹技术 (Northern blotting) 用于RNA的定性定量分析。DNA-RNA, RNA-RNA （三）蛋白质的印迹分析 (Western blotting) 用于蛋白质定性定量及相互作用研究。抗体－抗原 PCR概念、基本过程 聚合酶链反应 变性（denaturation） 2. 退火（annealling）3. 延伸（extension） 电泳的主要类型、用途 琼脂凝胶电泳(Agar Gel electrophoresis) 核酸 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) 核酸或蛋白 SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS－PAGE) 蛋白 真核细胞与原核细胞的主要区别 细胞核 膜性细胞器 骨架系统 组成核酸的主要化学成分有那些 碱基(base)：嘌呤碱，嘧啶碱 戊糖(ribose)：核糖，脱氧核糖 磷酸(phosphate) 蛋白质的四级结构 启动子、增强子 启动子 是促进DNA转录的DNA序列，是DNA分子上可与RNA pol 特异性识别结合并使之转录的部位，但启动子本身不被转录 增强子 是一段DNA序列，其中含有多个能被反式作用因子识别与结合的顺式作用元件。反式作用因子与这些元件结合后，通常为增强邻近基因的转录。 分子生物学中心法则 DNA及蛋白质分子化学修饰的方式 DNA 甲基化 蛋白质 磷酸化 糖基化 乙酰化 质粒 质粒（plasmid） 是独立于许多细菌及某些真核细胞染色体外共价闭合环状的DNA分子（cccDNA），能独立复制的最小遗传单位。 基因组 细胞或生物体中，一套完整单倍体遗传物质的总和（包括一种生物所需的全套基因及间隔序列）称为基因组。 干细胞的特点及其在医学研究中的意义（刘老师） 特点：高度的增殖潜能（自我更新能力或自我维持能力） 高度的分化潜能，能分化成多种组织。 可连续分裂几代，也可在较长时间内处于静止状态 意义：体外研究人胚胎的发生发育 非正常发育（通过改变细胞系的靶基因） 新人类基因的发现 药物筛选和致畸实验 作为组织移植、细胞治疗和基因治疗的细胞源 细胞外基质的主要成分 （1） 糖胺多糖，大多以蛋白聚糖的形式存在； （2） 纤维蛋白，包括胶原、弹性蛋白、纤连蛋白、