細胞工程动物组织和细胞培养.doc

三 培养细胞的生物学特征  洋蔥的表皮細胞 哺乳類的肌肉細胞  植物輸導水分的細胞 人類脊髓神經細胞 (一)体外培养细胞的分型 1 贴附型： 大多数培养细胞贴附生长，属于贴壁依赖性细胞. 有机体的绝大多数细胞必须粘附于一固相表面才能生存和生 长 按照培养细胞的主要形态，可分为几大类型 1)成纤维细胞型： 胞体呈梭型或不规则三角形，中央有卵 圆形核，胞质突起，生长时呈放射状。 例 心肌，平滑肌，成骨细胞，血管内皮 成纤维细胞 2)上皮细胞： 细胞呈扁平不规则多角形，中央有圆形 核，细胞彼此紧密相连成单层膜。 如皮肤表皮及其衍生物、消化管上皮、 肝胰、肺泡上皮等皆成上皮型形态。 上皮型细胞 3、游走细胞型： 呈散在生长，一般不连成片，呈活跃游走或变形运动， 方向不规则。此型细胞不稳定，有时难以和其他细胞相区 别。如单核细胞 、嗜酸性粒细胞 4、多型细胞型： · 有一些细胞，如神经细胞难以确定其规 律和稳定的形态，可统归于此类。 2 悬浮型： 见于少数特殊的细胞，如某些类型的癌细胞 及白血病细胞。胞体圆形，不贴于支持物上， 呈悬浮生长。这类细胞容易大量繁殖。 (二)培养细胞的生长和增殖过程 1 培养细胞生命期（Life Span of Culture Cells）  所谓培养细胞生命期，是指细胞在培养中持续增殖和生长 的时间。 1．原代培养（Primary Culture）期： 也称初代培养，即从体内取出组织接种培养 到第一次传代阶段，一般持续1一4周。此期细胞 呈活跃的移动，可见细胞分裂，但不旺盛。 ●初代培养细胞与体内原组织在形态结构和功能 活动上相似性大。细胞相互依存性强。 2．传代期： ●初代培养细胞一经传代后便改称做细胞系 （Cell Line）。 ●在全生命期中此期的持续时间最长。 ●在培养条件较好情况下，细胞增殖旺盛，并能 维持二倍体核型，呈二倍体核型的细胞称二倍体 细胞系（Diploid Cell Line）。 ●为保持二倍体细胞性质，细胞应在初代培养期 或传代后早期冻存。 ●当前世界上常用细胞均在不出十代内冻存。 ●一般情况下当传代10～50次左右，细胞增殖逐 渐缓慢，以至完全停止，细胞进入第三期。 3． 衰 退 期 ： ●此期细胞仍然生存，但增殖很慢或不增殖；细胞形 态轮廓增强，最后衰退凋亡。 ●在细胞生命期阶段，少数情况下，在以上三期任何 一点（多发生在传代末或衰退期），由于某种因素的 影响，细胞可能发生自发转化（Spontaneous Transformation）。 ●转化的标志之一是细胞可能获得永生性 （Immortality）。 ●细胞永生性也称不死性，即细胞获持久性增殖能 力，这样的细胞群体称无限细胞系（Infinite Cell Line），也称连续细胞系（Continuous Cell Line）。 ●无限细胞系的形成主要发生在第二期末，或第三 期初阶段。细胞获不死性后，核型大多变成异倍体 （Heteroploid）。 ●细胞转化亦可用人工方法诱发，转化后的细胞也 可能永生性.Transformation 1020  Primary 培养细胞生命期 1018 Culture Finite Cell Line Continuous Cell Line  1016 原代培养期 Subculture  1014 1012  2nd Subculture  Senescence and Cell Death  1010  传代期  衰退期  Subculture Interval 108 Serial Passage 106