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动物实验基本操作技术 河北大学 基础医学实验教学中心 主要内容 实验动物的选择、抓取与固定 实验动物的麻醉 实验动物的手术实施 实验动物的处死 一、实验动物的选择、抓取与固定 （一）实验动物的选择、抓取与固定 1、实验动物的选择:实验动物的选择直接关系到实验的成败和其可 行性、科学性等。 （1）常用的实验动物：犬、家兔、猫、大鼠、豚鼠、小鼠、鸡、 蛙、蟾蜍等。 （2）动物的选择依据 ①种属选择：豚鼠易致敏，家兔体温变化灵敏。 ②品系选择：近交系、突变系、杂交一代、封闭群、非纯系； 无菌动物、指定菌动物 、SPF动物、带菌动物 ③个体选择： 根据年龄、性别、及健康状况 （1）小鼠 捉拿时先用右手将鼠尾抓住提起，放在较粗糙的台面或鼠笼上，在其向前爬行时，右手向后拉尾，用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和头颈部皮肤，拉直四肢并用左手无名指压紧尾和后肢，右手即可作注射或其他实验操作。取尾血及尾静脉注射时，可将小鼠固定在金属或木制的固定器上。 （2）大 鼠 大鼠凶猛，实验者应戴帆布手套，用右手将大鼠尾抓住提起，放在较粗糙的台面或鼠笼上，抓住鼠尾向后轻拉，左手抓紧两耳和头颈部皮肤，余下三指紧捏鼠背部皮肤，如果大鼠后肢挣扎厉害，可将鼠尾放在小指和无名指之间夹住，将整个鼠固定在左手中，右手进行操作。也可借助专用布袋或鼠盒进行操作。 （3）豚鼠 豚鼠具有胆小易惊的特性，因此抓取时要求快、稳、准。一般方法是：先用右手掌迅速、轻轻地扣住豚鼠背部，抓住其肩脚上方，以拇指和示指环握颈部，对于体型较大或怀孕的豚鼠，可用另一只手托住其臀部。 （4） 蛙 和 蟾蜍 用左手将动物贴紧在手掌中，并以左手中指、无名指、小指压住其左腹侧和后肢，拇指和食指分别压住左、右前肢，右手进行操作。根据实验需要，可用图钉，采取俯卧位或仰卧位固定在蛙板上。抓取蟾蜍时，禁忌挤压两侧耳部毒腺，以免毒液射入眼中。 （5）家兔 一手抓住兔颈部的被毛与皮肤，另一手托其臀部或腹部，使其躯干的重量大部分集中在手上，然后称重。家兔麻醉后固定方式分仰卧位和俯卧位，仰卧位固定时，四肢用粗棉线固定，头用家兔头固定夹固定或用棉线钩住家兔门齿后再固定在家兔台头端铁柱上；进行头颅部手术时，多采用仰卧位固定配合马蹄形固定器进行固定。 1、不同的动物，选择不同的麻醉药物、实施不同的麻醉方法。 2、麻醉药物应用原则： 依据动物体重计算麻醉药物的剂量； 依据动物生命体征的变化控制给药的速度； 掌握宁少勿多、分阶段给药的方式。 （一）麻醉剂种类 应用范围：适用于各种实验动物的全身麻醉 作用机制：抑制中枢神经系统，使肌肉松弛 作用特点：麻醉安全系数较大、麻醉深度易于掌握等优点。 性 状：无色透明、极易挥发、具刺激 气味的特性 缺 点：对上呼吸道粘膜有较强的刺激作用，使分泌物增加，易发生呼吸 道阻塞。 其他药物：三氟乙烷、氯仿等，在教学实验中应用较少。 （二）麻醉剂用量 1、全身麻醉 （1）静脉注射麻醉： 戊巴比妥钠：3％，1 ml/kg 乌拉坦： 25%, 4 ml/kg （2）腹腔注射： 戊巴比妥钠： 0.5% ，0.1ml/10g （3）吸入麻醉：乙醚  2、局部麻醉: 1％普鲁卡因 颈部2～3ml，股部1～2ml （三）麻醉给药途径 1、选择给药途径的原则------ 可腹腔注射的药物不必通过静脉给药， 可肌肉注射的药物也应避免腹腔注射。 给药途径应按肌肉、腹腔、静脉的顺序。 2、给药途径 （1）肌肉注射------主要用于注射不溶于水的药物。 注射部位：肌肉发达、血管丰富的部位，如大鼠、小鼠和豚鼠的大腿外侧缘；家兔、猫、犬、猴的臀部或股部。 注射时固定动物，剪去注射部被毛，与肌肉层组织接触面呈60度角刺入注射器针头，回抽无回血后注入药液（小动物可免回抽针栓）。注射完毕后用手轻轻按摩注射部位，促进药液吸收。 （2）腹腔注射------啮齿类动物 注射部位：是左下腹部。进入腹腔有落空感，回抽无血液或尿液时即表示未伤及肝脏和膀胱。 （3）静脉