【2017年整理】化妆品限用禁用物质检测方法的研究.doc

化妆品限用禁用物质检测方法的研究 上海市食品药品检验所 一 研究目标 随着食品化妆品监督功能的转移，化妆品中药物非法添加（限用禁用物质）受到越来越多的关注。本课题在我国传统的化妆品安全卫生化学检测方法基础上，加入现代化的仪器分析手段来提高分析方法的灵敏度、选择性和准确性。初步建立化妆品中限用禁用物质的检测方法体系，为化妆品中限用禁用物质的快速检验和定性定量分析、标准方法的制定提供技术支持。 (1)我国现行化妆品标准规范 目前有GB7916 - 1987《化妆品卫生标准》、GB7917 - 1987《化妆品卫生化学标准检验方法》、GB7918 - 1987《化妆品卫生微生物标准检验方法》、GB7919 -1987《化妆品安全性评价程序和方法》等化妆品国家标准42个。卫生部出台了《化妆品卫生规范》（2002年版）和《卫生部化妆品检验规定》2个。新版的《化妆品卫生规范》（2007年版）于2007年7月1日正式执行。 (2)化妆品卫生安全问题及隐患 我国《化妆品卫生规范2002年版》制定的化学指标分析方法只有22个标准仅涉及57项,新版的《化妆品卫生规范》（2007年版）参考了欧盟对化妆品原料要求的有关规范，明显增加了禁用化学物质的种类和数量，化学类禁用物质1208项、植物类禁用物质78项、限用物质73 项、 限用防腐剂56项、限用防晒剂28项、限用着色剂157项。但其中明确有卫生化学检验方法的只有76项，总的方法覆盖率仅为4.8%。 二 研究结果 参照欧美同行化妆品执行标准,根据不同类别化妆品中禁用限用物质的性质，大力开展检测标准方法的研制, 研究并扩大检验方法中禁限用物质的检测技术，加快检验方法的标准化进程。 1 美白祛斑产品中过氧苯甲酰非法添加的分离测定（HPLC-DAD） 过氧苯甲酰作为药品可用于寻常痤疮的局部治疗，有报道称某些不法生产厂商为谋取利益在化妆品中非法添加此类物质。我们采用二元梯度洗脱方式对其进行分离测定进行研究，有效地避免化妆品基质和其他活性成分的干扰。 采用C18色谱柱，乙腈-水-36%醋酸（70:30:0.1）为流动相，在238nm处，取过氧化苯甲酰对照品（从冰箱中取出后在室温下放置约1小时）约480mg，精密称定，置100ml量瓶中，加溶剂[乙腈-水（70:30）]40ml，超声助溶，放冷用溶剂稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液（对照品储备液要在使用当天新配）精密量取对照品储备液适量，用溶剂稀释100倍，作为对照品溶液。 取化妆品约1.0g，精密称定，精密加入乙腈10ml，超声助溶，放冷，冷冻，离心，滤过，取续滤液作为供试品溶液。 过氧苯甲酰在0.5-65μg/ml浓度范围内呈良好线性，相关系数为0.99996，加样检出浓度为0.28μg/g,回收率为91%。 采用此方法对百余批样品进行了检测，分离良好，结果满意。 2 化妆品中抗生素及甲硝唑的快速高效液相色谱测定法研究 建立了祛痘除螨类化妆品中8种抗生素及甲硝唑同时测定的快速高效液相色谱分析方法。以Agielent 1200快速高效液相色谱，采用SB和XDB-C18（1.8μm,4.6 mm i.d.×50mm）色谱柱，0.1mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH为2.5）-乙腈为流动相进行梯度洗脱，在7分钟内首次实现了8种抗生素及甲硝唑的同时分离测定，常规液相色谱分离至少需要30分钟才能完成一次分析。在4～100μg/ mL 线性范围内，9种物质的线性相关系数均＞0.9999，最低检出限为0.25～1.4ng。在低中高三个添加水平，9种物质的平均回收率为92.2%～103.2%，相对标准偏差为0.04%～4.5%。并考察了不同状态的化妆品样品的提取方式。该法操作简便、准确、快速，能够检测祛痘除螨类化妆品中8种抗生素以及甲硝唑的含量。 文献查阅及市场调查表明，抗生素类及某些激素因对痤疮有一定的治疗效果而常用于外用药中，如甲硝唑、氯霉素、林可霉素等。我国《化妆品卫生规范》、欧盟化妆品规程（CoucilDirective76 /768/EEC） 规定抗生素类物质禁止在化妆品中使用。目前，我国《化妆品卫生规范》（2007 年版）已于2007年8月1日正式执行，其中首次提出了化妆品中五种四环素类抗生素及甲硝唑、氯霉素的标准检测方法。原永芳等采用高效液相色谱法测定了护肤粉刺霜中的甲硝唑、氯霉素、地塞米松磷酸钠及维甲酸等成分。王蕾等采用高效液相色谱法测定了药品中的四环素类抗生素。本文建立了化妆品中8种抗生素，即盐酸米诺环素、盐酸土霉素、盐酸四环素、盐酸金霉素、盐酸多西环素、氯霉素、林可霉素、克林霉素和甲硝唑9种禁用物质的快速高效液相色谱检测方法，并采用此方法对市场上的祛痘除螨类产品进行了测定。 1）实验部分 （1）仪器与试药 Agilent 1200高效液相