【2017年整理】常见致病菌的检测.docxVIP

常见致病菌的检测 摘要：近年来食品药品安全的问题屡见不鲜，做好致病菌的检测，是防范于未然的措施，因而显得尤为的重要，也越来越受到人们的重视。这就要求我们对一些常见的致病菌检测技术的要有一定的了解。 关键词：致病菌，肠球菌，霉菌和酵母菌，金黄色葡萄球菌，沙门氏菌。 一.肠球菌 （1）、形态与染色【1】 肠球菌为革兰阳性（G+）球菌,广泛分布于自然环境及人和动物消化道内。20世纪80年代以来，肠球菌严重感染的发生率和病死率明显升高，并且由于肠球菌的固有耐药和获得性耐药，使许多常用抗菌药物在治疗肠球菌感染时失败。因此，从分子水平对肠球菌致病因子、肠球菌引起的感染机制与治疗的研究显得尤为重要。肠球菌为圆形或椭圆形、呈链状排列的革兰阳性球菌，无芽胞，无鞭毛，为需氧或兼性厌氧菌。本菌对营养要求较高，在含有血清的培养基上生长良好。 （3）致病性【1】 一般而言，肠球菌的毒力不高。与 HYPERLINK /view/321509.htm \t _blank 金黄色葡萄球菌和 HYPERLINK /view/2690619.htm \t _blank 化脓性链球菌相比，肠球菌对大多数动物的半数致死量（LD50）值相当高，而且肠球菌很少引起蜂窝织炎和呼吸道感染。 　　肠球菌只有在宿主组织寄殖，耐机体非特异及免疫防御机制，并引起病理改变，才能导致感染。粘附测定显示肠球菌可通过细菌表面表达的为粘附素，吸附至肠道、尿路上皮细胞及心脏细胞。这些粘附素的表达亦受细菌生长环境的影响。另外，肠球菌可产生一种聚合物质（系一种蛋白表面物质，可聚集供体与受体菌，以利质粒转移），在体外增强其对肾小管上皮细胞的粘附。 　　细菌生长环境亦影响肠球菌与多形核白细胞反应。 HYPERLINK /view/42775.htm \t _blank 血清中生长的肠球菌与多形核 HYPERLINK /view/9572.htm \t _blank 白细胞反应较弱，而肉汤中生长的细菌反应较强。体外多形核白细胞对肠球菌的有效杀灭作用需血清补体蛋白参与，而抗肠球菌抗体可增强该作用。 （4）、肠球菌属主要检测步骤如下：【2】 方法一：肠球菌平板计数法检验程序 25g (mL) + 225 mL 缓冲蛋白胨水 ↓ 10 倍梯度稀释 ↓ 选择2 个~3 个适宜连续稀释度，各取1 mL 分别加入灭菌培养皿 ↙?????????????????????? ↘ ??????????????????KF琼脂36℃ 士1℃ 48h 士2h???????????? 肠球菌琼脂35℃士2 ?? ↘??????????? ↙ 确证实验 ↓ ?? 肠球菌阳性 ↓ ?? 菌落计数及计算 ↓ 报告结果 方法二：肠球菌最近似值（MPN ）测定法检验程序 25g（mL ) + 225 mL 缓冲蛋白胨水 ↓ 10 倍梯度稀释 ↓ 选择3 个适宜连续稀释度，各取1 ml 分别加入肉汤中 ↙???????????????? ↘ ?????叠氮化钠葡萄糖肉汤管?????????????????????????? 肠球菌肉汤管 ?????????????????37℃ 士1℃ , 24h~48h????????????????????????? 35C 士2 ℃ ↓???????? ↓????????????? ?????????? ↓?????????? ↓ ???????????????? 无混浊???????? 混浊???????????????????????????? 变黑???????? 不变黑 ????????????????????↓?????????? ↓??????????????????????????????? ↓?????????? ↓ ?????????????? 肠球菌阴性??? 确证实验 ?????????????????????? ?确证实验???? 肠球菌阴性 ↓?????????????????????? ?????? ??? ↓ 肠球菌阳性?????????????????????? 肠球菌阳性 ↘??????????????????????????????????? ↙ MPN 值法报告肠球菌数／g(mI) 二．霉菌和酵母菌 （1）、形态【1】 酵母菌是单细胞真核微生物。酵母菌细胞的形态通常有球形、卵圆形、腊肠形、椭圆形、柠檬形或藕节形等。比细菌的单细胞个体要大得多，一般为1-5微米×5-30微米。酵母菌无鞭毛，不能游动。其具有典型的真核细胞结构，有细胞壁、细胞膜、细胞核、细胞质、液泡、线粒体等，有的还具有微体。? 霉菌是丝状真菌的俗称，意