第六章紫外可见分光光度法-3-25.ppt

* 由于吸光度具有加合性，因此可以在同一试样中测定多个组份. 多组分的同时测定 设试样中有两组份 X 和 Y，将其显色后，分别绘制吸收曲线. * 若X,Y组分的吸收曲线互不重叠，则可在各自最大吸收波长处分别进行测定,可以按两个单一组份处理，如图（a)所示. 若X,Y组分的吸收曲线互有重叠，如图（b)和（c)所示，则可根据吸光度的加合性解联立方程组得出cx 及 cy的含量. 多组分的同时测定 * 复方苯甲酸酊含量的测定 复方苯甲酸酊系《中国医院制剂规范》西药二版收载品种. 处方组成: A 方, 苯甲酸60 g, 水杨酸30 g, 75%乙醇加至1 000 ml; B 方, 苯甲酸120g , 水杨酸60 g, 75%乙醇加至1 000 ml. 临床用于治疗干燥未破裂手足癣, 叠瓦癣等症, 疗效较好. 规范中对该制剂的含量测定是利用酸碱滴定法, 只能测定苯甲酸与水杨酸的总酸量, 无法分别测定苯甲酸与水杨酸的含量. 本文应用双波长分光光度法, 不经分离, 即可分别测定苯甲酸与水杨酸的含量. * 复方苯甲酸酊含量的测定 实验结果表明：苯甲酸在24~ 96 ?g/ml范围内线性关系良好( r= 0. 999 9) ; 水杨酸在6~ 36 ?g/ml范围内线性关系良好( r= 0. 9999) . 53WB 紫外分光光度计( 上海光学仪器厂) , 样品为医院自制. 苯甲酸的 ?max 为275 nm, 水杨酸的 ?max 为302 nm. * 复方苯甲酸酊含量的测定 结论：本方法不仅能同时测定苯甲酸与水杨酸的含量, 而且简便、快速, 结果与酸碱法一致, 可作为医院制剂的快速检验方法. * 高含量组分的测定-示差法 吸光光度法适用于微量组分的测定，当待测定组分浓度过高时，测得的吸光度值常常偏离朗伯--比尔定律.即使没有偏离，通常采用纯溶剂作参比使吸光度测量值过大，超出适宜读数范围引入较大误差，导致准确度大为降低，采用示差法可克服这一缺点. 示差法又称为示差分光光度法. 它与一般分光光度法区别在于它采用一个已知浓度作参比溶液，从而提高了测定的准确度，使其用于测定过高含量的组分，所以将这种吸光度测量方法来扩大测量范围并提高灵敏度和准确度的方法称之为示差法. * 示差法：以浓度为 Cs 的标准溶液为参比（Cx Cs） 适宜高浓度组分的测定. 标准溶液cs 、 c1、 c2、c3……; 以cs作参比，调A = 0; 测 c1 、 c2、c3……的△A; 用△A对△c作图; 同条件下测△Ax; 从示差工作曲线中查出△cx. 高含量组分的测定-示差法 ΔA △C △Cx ΔAx 示差工作曲线 ΔAx * 高含量组分的测定-示差法 Tx T 0 5 10 50 100 T 0 5 10 50 100 Tr,x Ts Ts 常规法 示差法 示差法提高准确度的实质 标尺扩展10倍 结论：示差法通过提高测量的准确度提高了方法的准确度. * 高浓度含磷废水的测定 废水中总磷浓度是经常变化的，遇到含磷量高的水样，用分光光度法测量时，吸光度超出了准确测量读数范围，只有将水样稀释消解处理后，才能进行分析. 而每次处理大约需要30-40min(铂锑抗分光光度法)，比较费时. 有时一次消解达不到要求，还需进行二次消解. 示差法: 用已知浓度的标淮作参比调零，再进行样品的测试。用所测得的吸光度值通过标准曲线算出其含量(m2)，再计算出参比液的含量(m1)，两者之和即为样品的含量. * 高浓度含磷废水的测定 * 高浓度含磷废水的测定 示差法解决了高含磷废水分析问题，具有较高的实用价值. * 酸碱离解常数的测定 HB H++B- Ka = [H+] [B-] [HB] (1) pKa=pH+lg [HB] [B-] 设：b=1cm A=A HB +AB- 例如：一元弱酸HB * A=?HB（c- [B-]) +?B-[B-] = ?HBc+[B-] (?B-- ?HB) 同理由（2）得： A=?HB[HB]+ ?B-(c-[HB]) = ?B-c+[HB] (?HB- ?B-) [B-] = A -?HB c ?B-- ?HB 则：A=A HB +AB-=?HB[HB]+ ?B-[B-] (2) ?[HB]= ?B-c-A ?B-- ?HB (3) (4) 将（3）（4）代入（1）中： Ka = [H+] [B-] [HB] C=[HB]+[B-] 酸碱离解常数的测定 * Ka= [H+](A -?HB c) ?B-c-A A HB = ?HB c AB-= ?B-c 定义： ? A -AHB Ka= [H+] AB--A pKa=pH+lg A -AHB AB