色譜分析法导论.docVIP

第九章_色谱分析法导论 现 代 仪 器 分 析 的四大波谱: 光谱法、核磁共振波谱法 、色谱法、 质法、 光谱法: 利用光(电磁辐射)作为 “探针” 来探测物质性质、含量和结构的光学分析法. 核磁共振波谱法:利用磁性核在外磁场作用下,核自旋能及跃迁原理来研究有机物的结构与组成的一种化学物理分析法. 质谱法:是将待测样品在离子源中转化为离子,然后利用离子在电磁场中运动的性质,将离子按质荷比(m/e)分开,记录并分析离子按质荷比大小排列质谱图,通过对质谱图的解析进行定性,定量分析. 色谱法:利用样品中各组分在固定相与流动相中受到的作用力不同，而将待分析样品中的各组分依次分离，然后顺序检测各组分含量的分离分析方法。 色谱法是一种分离技术,把这种分离技术应用到分析领域.并与适当的检测手段结合起来,就是色谱分析法. 由于色谱法的分离效率比常用分离方法(如重结晶、蒸馏、萃取等)高效.又有非常灵敏的检测手段.因此应用范围极其广泛,已成为生产、科研等各部门不可缺少的分离分析手段. 色谱法也叫层析法，它是一种高效能的物理化学分离技术，将它用于分析化学并配合适当的检测手段，就成为色谱分析法。 色谱法的最早应用是用于分离植物色素，其方法是这样的：在一玻璃管中放入碳酸钙，将含有植物色素（植物叶的提取液）的石油醚倒入管中。 一.色谱定义:：利用物质(样品)中组分在固定相与流动相中受到作用力不同,而将待测样品分离,然后顺序检测各组分含量的一种物理化学分析方法. 四.色谱的分类:1. 按流动相状态分:2、按固定相状态分: 按固定相的形式分类可分为 按分离机理分类 5. 按照展开程序分类6. 按仪器分类： 1.按流动相状态分: 液相色谱 气相色谱 液相色谱: 流动相为液体的色谱. 气相色谱: 流动相为气体的色谱. 2、按固定相状态分: 气-固色谱: 流动相为气体,固定相为固体的气相色谱. 气-液色谱: 流动相为气体,固定相为流动的气相色谱. 液-固色谱: 流动相为液体,固定相为固体 的液相色谱. 液-液色谱: 流动相为液体,固定相为液体的 液相色谱. 3 按固定相的形式分类可分为：柱 色谱： 固定相装在色谱柱中； 纸色 谱： 利用滤纸作载体，吸附在纸 上的水作固定相；薄层色谱：将固体吸附剂在玻璃板或塑料板上制成薄层作固定相。 吸附色谱: 利用组分在吸附剂上 的吸附能力 强弱不同而得以分离的方法。 分配色谱 : 利用组分在固定液（固定相） 溶解度不同而达到分离的方法。 离子交换色谱 :利用组分在离子交换剂（固定相）上的亲和力大小不同而 达 到分离的方法。 凝胶色谱 利用大小不同的分子在多孔固定相中的选择渗透而达到分离，称排阻色谱法。 电 色 谱 利用带电物质在电场下移动速度不同进行分离的色谱。 亲和色谱 利用不同组分与固定相（固定化分子）的高专属性亲和力进 行分离的色谱 色谱分离的过程 迁移 扩散 迁移----分离 色谱过程的热力学性质有关 扩散---峰宽 色谱过程的动力学性质有关。 如图所示为一色谱流出曲线： （一）色谱流出曲线和色谱峰 由检测器输出的电信号强度对时间作图,所得曲线称为色谱流出曲线.曲线上突起部分就是色谱峰。 如果进样量很小,浓度很低,在吸附等温线或分配等温线的线性范围内,则色谱峰是对称的. （二）基线：在实验操作条件下，色谱柱后没有样品组分流出时的流出曲线称为基 线，稳定的基线应该是一条水平直线。 （三）峰高：色谱峰顶点与基线之间的垂直距离，以（h）表示。 四) 色谱峰宽Y ： 色谱峰的区域宽度是色谱流出曲线的重要参数之一，衡量色谱柱的柱效及反映色谱操作条件下的动力学因素。宽度越窄，其效率越高，分离的效果也越好。 表示色谱峰区域宽度的三种方法 1.标准偏差s：即0.607倍峰高处色谱峰宽的一半。 2. 半峰宽Y1/2：即峰高一半处对应的峰宽。它与标准偏差的关系为 Y1/2=2.354s 3. 峰底宽度Y：即色谱峰两侧拐点上的切线在基线上截距的距离.它与标准偏差s的关系是 Y= 4 s （五）保留值 1. 死时间 tm：不被固定相吸附或溶解的物质进入色谱柱时，到出现峰极大值所需的时间称为死时间.它正比于色谱柱的空隙体积，因为这种物质不被固定相吸附或溶解. 2.保留时间tr：试样从进样到柱后出现峰极大点时所经过的时间，称为保留时间。 3.调整保留时间tr′：某组分的保留时间扣除死时间后，称为该组分的调整保留时间，即 tr′= tr -