過氧化氢与硫化氢在乙烯调控拟南芥气孔关闭过程中的相互关系.docVIP

青岛农业大学 毕 业 论 文（设计） 题 目：H2O2与H2S在乙烯调控拟南芥气孔关闭 过程中的相互关系 姓 名： 学 院： 生命科学学院 专 业： 生物技术 班 级： 学 号： 指导教师： 2011 年 6月 21日目 录 中文摘要…………………………………………………………………………………….…1 Abstract…………………………………………………………………….……………......…2 引言……………………………………………………………………………………...…..…4 1 材料与方法……………………………………………………………….…………...….…7 1.1 材料………………………………………………………….……………………….……7 1.2 方法……………………………………………………………….……………….………7 1.2.1 气孔开度的测定………………………………………………………………...………7 1.2.2 保卫细胞胞内H2O2的检测………………………………….…………………………7 1.2.3 拟南芥叶片H2S含量的测定……………………………………………..............….…7 1.2.4拟南芥叶片L/D-半胱氨酸脱巯基酶活性的测定…………………...………………….8 2 结果与分析…………………………………………………………………….………..…..9 2.1 H2O2参与乙烯对气孔运动的调控…………………………………….....….…….……...9 2.1.1 乙烯诱导气孔关闭…………………………………………………………….…......…9 2.1.2 H2O2清除剂和合成抑制剂对乙烯诱导气孔关闭的影响…………………...…………9 2.2 H2S参与乙烯诱导气孔关闭过程……………………………………………………......10 2.3 H2O2与H2S在乙烯诱导气孔关闭过程中的相互关系………………………...……….10 H2O2位于H2S上游参与乙烯诱导气孔关闭的可能性……………………...………..10 2.3.1.1 H2O2清除剂及合成酶抑制剂对乙烯调控的拟南芥叶片H2S含量的影响.……….10 2.3.1.2 H2O2清除剂及合成酶抑制剂对乙烯调控的拟南芥叶片H2S合成11 2.3.1.3乙烯对拟南芥H2O2合成突变体叶片H2S含量的影响…………………………….12 2.3.1.4乙烯对拟南芥H2O2合成突变体叶片H2S合成酶活性的影响……………….…….12 2.3.2 H2O2位于H2S下游参与乙烯诱导气孔…..……………………..…….13 2.3.2.1 H2S清除剂及合成酶抑制剂对乙烯调控的拟南芥保卫细胞H2O2含量的影响…..13 2.3.2.2乙烯对拟南芥野生型及H2S突变体保卫细胞H2O2含量的影响……………….…14 3 讨论…………………………………………………………………………………..…….15 致谢……………………………………………………………………………………….…..16 参考文献………………………………………………………………………………….…..17 H2O2与H2S在乙烯调控拟南芥气孔关闭过程中的相互关系 生物技术专业 指导教师 教授 摘要：以拟南芥野生型、H2S合成突变体（Atl-cdes和Atd-cdes）和H2O2合成突变体（Atpao2, Atpao4, AtrbohF, AtrbohD）为材料，综合应用植物生理学和激光共聚焦显微技术，结合药理学实验观测乙烯对气孔运动的影响，检测处理前后气孔保卫细胞H2O2和叶片H2S含量及其相关酶的变化，从组织水平、细胞水平和遗传水平为H2S和H2O2参与乙烯调控气孔运动的信号转导过程提供实验证据，并探讨二者的相互关系。 结果表明，在一定浓度范围内，乙烯利可诱导拟南芥气孔关闭；H2O2的清除剂（ASA和CAT）和合成抑制剂(DPI和SHAM)可抑制乙烯诱导气孔关闭的效应，且乙烯利能够引起气孔保卫细胞胞内H2O2的升高；H2S主要合成酶L/D-半胱氨酸脱巯基酶的抑制剂AOA、NH2OH，及