鄰二氮杂菲分光光度法测定铁实验报告.docVIP

分析化学实验报告 实验题目： 邻二氮杂菲分光光度法测定铁 学 院： 专 业： 食品科学与工程 班 级： 姓 名： 学 号： 同组者姓名： 实验目的 了解分光光度法测定物质含量的一般条件及其选定方法 掌握邻二氮杂菲分光光度法测定铁的方法 了解722型分光光度计的构造和使用方法 实验原理 光度法测定的条件：分光光度法测定物质含量时应注意的条件主要是 显色反应的条件和测量吸光度的条件。显色反应的条件有显色剂用量、介质的酸度、显色时溶液温度、显色时间及干扰物质的消除方法等;测量吸光度的条件包括应选择的入射光波长，吸光度范围和参比溶液等。 在PH=2-9的条件下，Fe2+与邻二氮杂菲（o-ph）生成极稳定的橘红色配合物，反应式如下： 此配合物的lgK稳 =21.3 摩尔吸收系数ε510 =1.1×104 在显色前，首先用盐酸羟胺把Fe2+ 还原成Fe3+.其反应式如下： 2Fe 3+ +2NH 2 OH· HC1 ＝2Fe 2+ +N 2 ↑+2H 2 O+4H + +2C1- 测定时，控制溶液酸度在PH=5左右较为适宜。酸度过高时，反应进行较慢;酸度太低，则Fe 2+水解，影响显色。 实验仪器 分光光度计、容量瓶、移液管、洗瓶 四、实验步骤 条件实验 吸收曲线的测绘准确吸取20 μg·mL-1铁标准溶液5 mL于50 mL容量瓶中，加入5%盐酸羟胺溶液1 mL，摇匀，加入1 mol·L-1NaOAc溶液5 mL和0.1%邻二氮杂菲溶液3 mL。以水稀释至刻度，摇匀。放置10 min，在722型分光光度计上，用1 cm比色皿，以水为参比溶液，波长从570 nm到430 nm为止，每隔10 nm测定一次吸光度。如图1所示，其最大吸收波长为510 nm，故该实验选择测定波长为510 nm。 邻二氮杂菲-亚铁配合物的稳定性 用上面溶液继续进行测定，其方法是在最大吸收波长510 nm处，每隔一定时间测定其吸光度，及再加入显色剂后立即测定一次吸光度，经10、20、30、120 min后，再各测一次吸光度。 （3）显色剂浓度实验 取50 mL容量瓶7只，编号。每只容量瓶中准确加入20 ug·mL-1铁标准溶液5 mL以及1mL5%盐酸羟胺溶液，经2 min后。再加入5 mL1 mol·L-1NaOAc溶液，然后分别加入0.1%邻二氮杂菲溶液0.3mL、0.6mL、1.0 mL、1.5 mL、2.00 mL、3.0 mL和4.0 mL，用水稀释至刻度，摇匀，在分光光度计上，用最大吸收波长510 nm、1 cm比色皿，以水为参比，测定上述溶液的吸光度。 2.铁含量的测定 （1）标准曲线的绘制 取50mL容量瓶6只，编号。分别吸取20 μg·mL-1铁标准溶液2.0mL、4.0 mL、6.0 mL、8.0 mL和10.0 mL于5只容量瓶中，另一只容量瓶中不加标准溶液（配制空白溶液，作参比）。然后各加5%盐酸羟胺溶液，摇匀，经2 min后，再各加5 mL1 mol·L-1NaAc溶液及3 mL1 g·L-1邻二氮杂菲溶液，以水稀释至刻度线，摇匀。放置10 min，在分光光度计上，用1 cm比色皿，在510 nm处，测定各溶液的吸光度。以铁含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。 未知液中铁含量的测定 吸取5ml未知液代替标准溶液，其他步骤均同上测定吸光度。由未知液的吸光度在标准曲线上查出5ml未知液中的铁含量，然后以每毫升未知液中含铁多少微克表示结果。 五、记录与计算 吸收曲线的测绘 波长 吸光度A 570 550 530 520 510 500 490 470 450 430 0.067 0.152 0.345 0.428 0.454 0.440 0.426 0.402 0.343 0.297 讨论：从曲线可以看出，在一定范围内，当波长较小时，随波长增加吸光度增加。测定的适宜波长是510nm。 （2）邻二氮杂菲亚铁配合物的稳定性 放置时间 0 5 10 15 20 稳定性 0.389 0.390 0.389 0.389 0.389 讨论：从曲线可以看出，配合物稳定性较好。 (3) 显色剂用量的测定 容量瓶号 显色剂量/mL 吸光度A 1 2 3 4 5 6 7 0.3 0.6 1.0 1.5 2.0 3.0 4.0 0.125 0.235 0.386 0.418 0.428 0.415 0.424 讨论：当显色